Tam je velký zájem o vývoj nových léků nebo metod, které by zmírnění alergických onemocnění ovlivňující molekulární IgE činnosti způsobem, který je bezpečný, efektivní a pohodlný (Tabulka 1).
Metody pro neutralizaci IgE v krvi
IgE je důležitým cílem pro alergické onemocnění terapie. Hlavní metodou IgE neutralizace sledovány zahrnuje dosažení konkrétních vazba a neutralizace volného IgE v séru, aby se zabránilo to z vazby na receptory na cílových buňkách, čímž inhibuje alergenem indukované předčasné/pozdní alergické reakce (Obr. 1).
Systém anti-IgE terapie strategie pro IgE-zprostředkované alergické onemocnění. Prostřednictvím imunoadsorpce mohou být volné IgEs v séru specificky vázány a neutralizovány, čímž se zabrání asociaci IgE s IgE receptory na cílových buňkách a tím se potlačují časné / pozdní alergické reakce. CTLA4Fce a podobné látky potlačují vznik alergických reakcí snížením počtu efektorových buněk a tím i množství alergických mediátorů. Imunologických léků, jako quilizumab, zmírnit alergie potlačuje IgE+ B buňky a ovládání IgE generace
Immunoadsorption
Immunoadsorption (IA), také volal imunitní aferézy, byl přijat jako efektivní léčba pro autoprotilátek-zprostředkované onemocnění . IA využívá plazmaferézu k odstranění imunoglobulinových a imunitních komplexů a v cytaferéze imunitních buněk z oběhu . V souladu s tím by IA mohla být úspěšně aplikována u pacientů s těžkou atopickou dermatitidou a vysokými hladinami IgE v séru . Byl vyvinut adsorbér specifický pro IgE, nazvaný IgEnio . Pilotní studie naznačuje, že přípravek IgEnio může být použit k léčbě alergického astmatu vyvolávajícího pyl .
Omalizumab
Omalizumab, vyvinutý společností Novartis®, je rekombinantní humanizovaná monoklonální protilátka proti IgE . Selektivně se váže na doménu Ce3 fragmentu Fc na těžkém řetězci volného IgE, což významně snižuje dostupnost IgE . Protože Ce3 doména zprostředkovává vazby IgE s α řetězce IgE receptory, omalizumab se střetává s IgE-FceRI interakce, čímž se zabrání žírných buněk/bazofilů degranulace a, nakonec, snižuje aktivaci zánětlivých buněk a uvolnění pro-zánětlivých faktorů . Kromě toho IgE vazba FceRII na B buňky podporuje zachycení antigenu a aktivaci Th2. Omalizumab tedy může blokovat procesy prezentující antigen zprostředkované IgE a inhibovat TH2 amplifikaci zánětlivých reakcí .
omalizumab je však spojen s bezpečnostními obavami. Protože nemůže rychle snížit hladiny IgE, vyžaduje dlouhý (několik týdnů) nepřetržitý léčebný cyklus . Americký Úřad pro kontrolu potravin a léčiv (FDA) varuje, že dlouhodobé užívání omalizumabu mírně zvyšuje riziko arteriální trombózy a může mít negativní dopady na srdeční a mozkovou cirkulaci . Vzhledem k tomu, že dlouhodobý režim je nákladný, doporučuje se omalizumab především u těžkých případů astmatu . Kromě toho, léčba omalizumabem u pacientů s chronickou spontánní urtikarií, vedla v klinické dávky po 12 týdnech léčby od úrovně FceRI a IgE výraz basofily v periferní krvi se rychle snižuje .
kromě toho byl CMAB007, biologicky podobný omalizumabu, vyvinut Národním inženýrským výzkumným centrem pro protilátkovou medicínu v Číně. Má stejnou aminokyselinovou sekvenci jako omalizumab a byla dokončena klinická studie fáze III v Číně schválení místními odděleními . Nyní, lék CMAB007 pro léčbu pacientů s alergickým astmatem je v rámci rozsáhlých klinických studiích (NCT03468790) v Číně, což je multicentrická, randomizovaná, dvojitě zaslepená, placebem kontrolovaná studie fáze III.
Ligelizumab (QGE031)
Ligelizumab, také vyvinutý společností Novartis®, je humanizovaná IgG1 monoklonální antibodytargeting v Ce3 regionu IgE . Stejně jako omalizumab, ligelizumab inhibuje vazbu volného IgE na žírné buňky a bazofily, čímž blokuje kaskádu alergické reakce a přináší klinický přínos pro pacienty trpící alergickými onemocněními zprostředkovanými IgE.
klinické studie Fáze II zkoumající farmakokinetiku, farmakodynamiku a bezpečnost ligelizumab ukázal, že to může snížit hladiny IgE efektivněji než omalizumab prostřednictvím inhibice IgE-FceRI závazné a že to může produkovat lepší výsledky, jak je uvedeno kožní prick testy alergenů odpovědi . Proto má ligelizumab potenciál být dobrým Anti-IgE lékem pro alergickou terapii.
MEDI4212
MEDI4212, zlidštění IgG1λ monoklonální protilátky generované phage display technologie, neutralizuje volné IgE vazbou selektivně na Ce3 a Ce4 domén IgE . Afinita MEDI4212 na lidské IgE byla prokázána 1.95 pM in vitro, která je stokrát vyšší než omalizumabu . Protože oblast Ce3 je rozhodující pro interakci IgE s jeho receptory, MEDI4212 inhibuje vazbu IgE s FceRI/FceRII.
I. fáze klinického hodnocení (NCT01544348) ukázal, že MEDI4212 je účinnější než omalizumab ve snížení sérové hladiny IgE hospitalizovaných pacientů se hladiny IgE ≥ 30 IU/mL, a to MEDI4212 léčba snižuje exprese FceRI na dendritických buněk a bazofilů . Farmakokinetická analýza však ukázala, že MEDI4212 je rychle odstraněn in vivo, takže dlouhodobý příjem je pravděpodobně nezbytný pro udržení suprese IgE .
MEDI4121 může být mutagenizován, aby se zlepšily Farmakokinetické vlastnosti léčiva. Varianta MEDI4121, ve kterém Fc fragment byl změněn na zvýšení afinity pro FcyRIIIa, která down-reguluje IgE výraz B buňky než se člení na IgE vylučovat plazmatické buňky . Proto jsou varianty MEDI4121 novými imunoterapeutickými kandidáty jak pro neutralizaci IgE, tak pro eliminaci IgE+ B buněk.
rekombinantní jednořetězcová protilátka s variabilním fragmentem (ScFv)
rekombinantní ScFv je produkována cDNA kódující těžké a lehké ig řetězce. Studie založené na biosenzoru prokázaly, že rekombinantní ScFv váže lidský IgE rychle a efektivně (afinita, 1,52 × 10-10 M). IgE + B buňky), stejně jako volný IgE in vivo . Pokusy In vitro ukázaly, že rekombinantní ScFv nesíží s efektorovými buňkami IgE+ ani nespouští degranulaci bazofilů/žírných buněk. Rekombinantní ScFv lze také použít ke zkoumání aktivit IgE za zdravých i chorobných podmínek, což z něj činí užitečný nástroj pro vývoj léčiv.
IgE efektorové buňky inhibice
Imunitní efektorové buňky, včetně žírných buněk, bazofilů, eosinofilů, které jsou kritické pro odstranění cizorodých látek a antigenů, jsou hlavním zdrojem prozánětlivých faktorů. Zejména jsou žírné buňky klíčovými buňkami, které indukují alergické astma, a počet žírných buněk u astmatických pacientů je významně zvýšen . Po stimulaci alergenů vylučují žírné buňky autakoidní mediátory histamin, prostaglandin (PG) D2 a leukotrien (LT) C4, které jsou schopné indukovat bronchokonstrikci, sekreci hlenu a edém sliznice, všechny rysy astmatu . Bazofily degranulate pro okamžité uvolňování histaminu, rychle generovat LTC4, a produkují Th2 cytokiny poskytuje mechanický základ, kterým bazofilů může způsobit okamžité přecitlivělosti klinických příznaků . Zvýšený počet bazofilů je běžný během anafylaktické reakce . Snížení počtu efektorových buněk tak snižuje materiálový základ anafylaxe a může inhibovat základní vývoj alergických reakcí.
Anti-FceRI Fab-konjugované celastrol-naložený polymerní micely
Celastrol je bioaktivní sloučeniny extrahované z Tripterygium wilfordii (bůh Hromu révy), které mohou indukovat T buněk apoptózu . Cílení celastrolu konkrétně na žírné buňky způsobem, který také snižuje jeho toxicitu, je tedy atraktivní potenciální cestou pro léčbu alergických onemocnění. Tento přístup byl sledován cross-linking celastrol s anti-FceRI Fab, které bylo prokázáno, že k vyvolání žírných buněk apoptózu, což eliminuje s nimi jejich pro-zánětlivý faktor cargo, a omezit celastrol toxicity . Léčba alergické astma modelu myší s anti-FceRIa Fab-konjugované polymerní micely bylo prokázáno, že snižuje sekreci zánětlivých faktorů a eosinofilní infiltrace rychle a vést k remisi příznaků vaječný albumin-indukované alergické příznaky zánětu . Schopnost polymerních micel s konjugovaným celastrolem Anti-FceRIa Fab blokovat vazbu IgE žírných buněk a indukovat apoptózu žírných buněk z něj činí velmi atraktivní lék pro alergická onemocnění typu I i pro jiná onemocnění související s žírnými buňkami.
bylo prokázáno, že polymerní micely konjugované proti Fcerii Fab snižují alergické reakce účinněji než omalizumab . Následující biochemické faktory mohou být základem této příznivé účinnosti: (1) Rozšíření farmakokinetiky polymerními micelami; (2) propagace drog agregace v cílové tkání a cílových buněk; a (3) konkurenční vazba s FceRI na povrchu žírných buněk, což vede ke snížení degranulaci žírných buněk.
Syntetické cytotoxických T-lymfocytů-associated protein 4 (CTLA4) mísil s Fce
CTLA4 (.k.a., CD152) je protein receptor, že funguje jako imunitní checkpoint, down-reguluje imunitní odpovědi. Je konstitutivně exprimován v CD4+CD25+ Foxp3+regulačních T buňkách, ale je upregulován pouze v konvenčních T buňkách. CTLA4 je homologní k T-buněk co-stimulační proteinCD28, a to jak vázat molekuly CD80(B7-1), CD86(B7-2) na antigen-prezentující buňky . Váže CD80 a CD86 s větší afinitou a aviditou než CD28, což mu umožňuje konkurovat CD28 pro jeho ligandy . CTLA4 přenáší inhibiční signál do T buněk, zatímco CD28 vysílá stimulační signál .
vědci vytvořili fúzní protein obsahující doménu CTLA-4 vázající CD80/CD86 a doménu vázající receptor FCE řetězce IgE H . Tento rekombinantní protein váže jak receptory FceRI/FceRII, tak receptory CTLA-4 (tj. CD80 a CD86), čímž potlačuje Th2 odpovědi. CTLA4 Fcɛ a CD23-CD80/CD86 dohromady tvoří multi-molekuly polymeru, který působí jako distanční ovlivňovat výrobu rozpustné CD23. V experimentu zahrnující lidské periferní krevní mononukleární buňky vzorků stimulovaných in vitro, CTLA4 Fcɛ snižuje rychlost proliferace lymfocytů v přítomnosti lektin concanavalin A; ve stejném experimentu bylo také prokázáno, že CTLA4 Fcɛ váže IgE receptory na efektorových buňkách, čímž ovlivňuje rozpustnou biosyntézu CD23 a inhibuje proliferaci lymfocytů . Vzhledem ke své prokázané schopnosti ovlivnit hladiny IgE a produkci IgE secernujících buněk, rekombinantní fúzní protein CTLA4Fcɛ může být účinný lék pro ovládání IgE-zprostředkované imunity a dalších souvisejících onemocnění .
cílení na IgE + B buňky
IgE + B buňky jsou rozhodující pro řízení produkce IgE. Jak přechodný IgE vylučovaný plazmatickými blasty v krvi, tak dlouho žijící IgE vylučovaný plazmatickými buňkami v kostní dřeni jsou ovlivněny IgE + B buňkami .
Quilizumab (h47H4)
Membránové vazbou IgE na povrchu B lymfocytů má velký význam pro IgE produkci. Má navíc 52-aminokyselinový fragment obsahující CemX mezi doménou CH4 IgE a jejím segmentem ukotvujícím membránu B-buněk . CemX je místo vázající antigen IgE-syntézy spáchaných B buněk . CemX je cílově specifický i buněčně specifický, což z něj činí velmi vhodný cíl léku.
Quilizumab, vyvinutý společností Genentech®, je nová umělá monoklonální protilátka, která cílí na CemX na IgE+ B buňkách. Vytváří zesíťování membránově vázaných receptorů IgE antigenu na B buňkách, což indukuje apoptózu IgE+ B buněk, čímž snižuje volné hladiny IgE a inhibuje tvorbu IgE + B buněk . Protože poločas volného IgE je poměrně krátký, představuje tento lék účinný prostředek ke snížení IgE odstraněním buněk, které exprimují membránové IgE .
klinická studie fáze II ukázala, že quilizumab je účinným kandidátem na bezpečnou léčbu alergických onemocnění as vysokou specificitou . Bylo prokázáno, že Quilizumab snižuje celkové IgE a specifické hladiny IgE v séru pacientů s astmatem a tento účinek trval 6 měsíců . Doufáme, že quilizumab bude užitečný při léčbě a prevenci některých onemocnění zprostředkovaných IgE, zejména těch, pro které nejsou k dispozici žádné současné léky . Léčba quilizumabem však nepřinesla klinicky významný přínos u pacientů s alergickým astmatem nedostatečně kontrolovaných standardní terapií, navzdory vysoké schopnosti snižovat hladiny IgE v séru a dobrému profilu snášenlivosti .
Bispecifická (bsc) IgE-CD3 protilátka
existuje několik typů IgE + B buněk, včetně plazmatických blastů, plazmatických buněk a IgE + paměťových B buněk. Nejčasnější experiment zaměřený na eliminaci IgE + B buněk specificky usiloval o modifikaci receptorů T-buněk v kombinaci s anti-IgE monoklonální protilátkovou aktivitou . Protilátka bsc-IgE / CD3 je uměle modifikovaná cílená protilátka specifická pro IgE i CD3. To se specificky váže na buňky, které exprimují membránové vazbou IgE a může re-přímá cytotoxicita prestimulated lidské T buňky k IgE+ B buňky, přinejmenším in vitro, aniž by došlo degranulace žírných buněk nebo uvolnění volného IgE. Bsc-IgE / CD3 je protilátka, která může eliminovat jak IgE + B buňky, tak i volné IgE v séru . Proto je bsc-IgE / CD3 novým kandidátským lékem na alergická onemocnění zprostředkovaná IgE.
XmAb7195
FcyRIIß se podílí na homeostáze B-buněk a abnormality FcyRIIß vedou k autoimunitním onemocněním . Román protilátky známé jako XmAb7195 byl produkován humanizace, afinitní maturace, a Fc inženýrství pomocí myší anti-IgE protilátka jako šablonu . XmAb7195 může izolovat volného IgE v séru, tvořící imunitní komplexy s FcyRIIß a IgE receptory na B-buňky, které brání tvorbě IgE+ B buňky a snížit volné a celkové hladiny IgE, aniž by to ovlivnilo antigen isotypes dalších B buněk . Protože má přidanou schopnost vazby FcyRIIß, XmAb7195 může inhibovat diferenciaci IgE+ B buněk, čímž se snižuje počet plazmatických buněk vylučujících IgE. Tento spolehlivý dvojitý mechanismus lze využít ke snížení celkových hladin IgE, zatímco zbývající volný IgE může být cílen nepřetržitě a efektivně. Klinická studie fáze I (NCT02148744) ukázala, že XmAb7195 je účinnější při snižování aktivity IgE než omalizumab .