on suurta kiinnostusta kehittää uusia lääkkeitä tai menetelmiä, jotka lievittäisivät allergisia sairauksia vaikuttamalla molekyyli-IgE: n toimintaan turvallisella, tehokkaalla ja kätevällä tavalla (Taulukko 1).
menetelmät IgE: n neutraloimiseksi veressä
IgE on tärkeä kohde allergisten sairauksien hoidossa. Tärkein menetelmä IgE neutralisointi pyritään saavuttaa erityinen sitoutuminen ja neutralisointi vapaan IgE seerumissa estää sitä sitoutumasta reseptoreihin kohdesolujen, mikä estää allergeenin aiheuttama aikaisin / myöhään allergisia reaktioita (Fig. 1).
Scheme of anti-IgE therapy strategies for IgE-mediated allergic diseases. Immunoadsorption kautta seerumin vapaat iGet voidaan sitoutua spesifisesti ja neutraloida, jolloin IgE-yhteys kohdesolujen IgE-reseptoreihin estyy ja varhaiset/myöhäiset allergiareaktiot vaimenevat. CTLA4Fce ja vastaavat aineet estävät allergisten reaktioiden syntymistä vähentämällä efektorisolujen määrää ja siten allergisten välittäjäaineiden määrää. Immunologiset lääkkeet, kuten quilitsumabi, lievittävät allergioita tukahduttamalla IgE + B-soluja ja säätelemällä IgE-tuotantoa
Immunoadsorptio
Immunoadsorptio (IA), jota kutsutaan myös immuuniafereesiksi, on hyväksytty tehokkaaksi hoidoksi autovasta-ainevälitteisissä sairauksissa . IA hyödyntää plasmafereesissä immunoglobuliini-ja immuunikomplekseja ja sytafereesissä immuunisoluja verenkierrosta . Näin ollen IA: ta voitaisiin käyttää menestyksekkäästi potilailla, joilla on vaikea atooppinen ihottuma ja korkea seerumin kokonais-IgE-taso . On kehitetty IgE-spesifinen adsorber eli IgEnio . Pilottitutkimuksen mukaan Igeniota voidaan käyttää siitepölyä aiheuttavan allergisen astman hoitoon .
omalitsumabi
omalitsumabi, jonka on kehittänyt Novartis®, on rekombinantti humanisoitu monoklonaalinen vasta-aine IgE: tä vastaan . Se sitoutuu valikoivasti vapaan IgE: n raskaassa ketjussa olevan Fc-fragmentin Ce3-domeeniin, mikä vähentää IgE: n saatavuutta merkittävästi . Koska Ce3-domeeni välittää Ige-sitoutumisen Ige-reseptorien α-ketjuun, omalitsumabi häiritsee IgE-FceRI-interaktiota estäen siten syöttösolujen/basofiilien degranulaatiota ja viime kädessä vähentää tulehdussolujen aktivoitumista ja tulehdusta edistävien tekijöiden vapautumista . Lisäksi Fcerii: n Ige-sitoutuminen B-soluihin tukee antigeenikaappausta ja Th2-aktivaatiota. Näin omalitsumabi voi estää IgE-välitteisen antigeenin esittelyprosesseja ja estää tulehdusreaktioiden th2-monistumista .
omalitsumabiin liittyy kuitenkin turvallisuusongelmia. Koska se ei voi alentaa IgE-tasoja nopeasti, se vaatii pitkän (useita viikkoja) jatkuvan hoitosyklin . Yhdysvaltain elintarvike-ja lääkevirasto (FDA) varoittaa, että omalitsumabin pitkäaikainen käyttö lisää hieman valtimotukoksen riskiä ja voi vaikuttaa haitallisesti sydän-ja aivoverenkiertoon . Koska pitkäaikainen hoito on kallista, omalitsumabia suositellaan ensisijaisesti vaikeiden astmatapausten hoitoon . Kroonista spontaania urtikariaa sairastavien potilaiden omalitsumabihoidosta oli lisäksi kliinistä hyötyä 12 viikon hoidon jälkeen, koska perifeerisen veren basofiilien fceri-ja IgE-pitoisuudet pienenivät nopeasti .
lisäksi CMAB007, omalitsumabin biosimilaari, kehitettiin National Engineering Research Center of Antibody Medicine Of China. Sillä on sama aminohappojärjestys kuin omalitsumabilla, ja se on viimeistelty vaiheen III kliinisessä tutkimuksessa Kiinassa paikallisten osastojen hyväksynnässä . Nyt lääke CMAB007 allergisten astmapotilaiden hoitoon on laajamittaisissa kliinisissä tutkimuksissa (Nct03468790) Kiinassa, joka on monikeskus, satunnaistettu, kaksoissokkoutettu, lumekontrolloitu vaiheen III tutkimus.
Ligelitsumabi (QGE031)
Ligelitsumabi, joka on myös Novartis®: n kehittämä, on humanisoitu IgG1-monoklonaalinen antibodylääke, joka kohdistaa IgE: n Ce3-alueeseen . Omalitsumabin tavoin ligelitsumabi estää vapaan IgE: n sitoutumista syöttösoluihin ja basofiileihin, mikä estää allergisen reaktion kaskadin ja tuottaa kliinistä hyötyä IgE-välitteisistä allergisista sairauksista kärsiville potilaille.
vaiheen II kliiniset tutkimukset, joissa tutkittiin ligelitsumabin farmakokinetiikkaa, farmakodynamiikkaa ja turvallisuutta, osoittivat, että ligelitsumabi voi alentaa IgE-tasoja tehokkaammin kuin omalitsumabi estämällä IgE-FceRI-sitoutumista ja että se voi tuottaa parempia tuloksia, kuten ihon pistoallergeenitestivasteet osoittavat . Näin ollen ligelitsumabilla on potentiaalia olla hyvä anti-IgE-lääke allergian hoidossa.
MEDI4212
MEDI4212, humanisoitu IgG1λ monoklonaalinen vasta-aine, joka on tuotettu faaginäyttötekniikalla, neutraloi vapaan IgE: n sitoutumalla selektiivisesti IgE: n Ce3-ja Ce4-domeeneihin . MEDI4212: n affiniteetti ihmisen IgE: hen osoitettiin 1, 95 pM in vitro, mikä on sata kertaa suurempi kuin omalitsumabilla . Koska Ce3-alue on elintärkeä IgE-interaktiolle sen reseptoreihin, MEDI4212 estää IgE: n sitoutumisen FceRI/FceRII: hen.
faasin I kliininen tutkimus (NCT01544348) osoitti, että MEDI4212 pienentää omalitsumabia tehokkaammin seerumin IgE-pitoisuuksia potilailla, joiden IgE-pitoisuus on ≥ 30 IU/mL, ja että MEDI4212-hoito vähentää FceRI: n ilmentymistä dendriittisoluihin ja basofiileihin . Farmakokineettinen analyysi kuitenkin osoitti, että MEDI4212 poistuu nopeasti in vivo, joten pitkäaikainen saanti on todennäköisesti tarpeen IgE-suppression ylläpitämiseksi .
MEDI4121 voidaan mutageenisoida lääkkeen farmakokineettisten ominaisuuksien parantamiseksi. Medi4121: n muunnos, jossa Fc-fragmenttia muutettiin tehostamaan affiniteettia Fcyriiiaan, joka säätelee B-solujen IgE-ilmentymistä ennen kuin ne ovat erilaistuneet IgE: tä erittäviksi plasmasoluiksi . Siksi MEDI4121-muunnokset ovat uusia immunoterapeuttisia ehdokkaita sekä IgE-neutralisaatioon että IgE+ B-solujen eliminaatioon.
rekombinantti yksiketjuinen variable-fragment (ScFv) – vasta-aine
rekombinantti ScFv tuotetaan cDNA: n koodaamalla raskaat ja kevyet Ig-ketjut. Biosensoripohjaiset tutkimukset ovat osoittaneet, että rekombinantti ScFv sitoo ihmisen IgE: tä nopeasti ja tehokkaasti (affiniteetti 1, 52 × 10-10 M) . Se voi sitoa soluun sitoutunutta IgE: tä (eli IgE+ B-soluja) sekä vapaata IgE: tä in vivo . In vitro-kokeet osoittivat, että yhdistelmä-DNA-tekniikalla tuotettu ScFv ei risteyty IgE+ – efektorisolujen kanssa eikä laukaise basofiilin/syöttösolujen degranulaatiota. Rekombinantti ScFv: tä voidaan käyttää myös IgE: n toiminnan tutkimiseen sekä terveissä että sairaissa olosuhteissa, joten se on hyödyllinen lääkekehitysväline.
IgE-efektorisolujen inhibitio
Immuuniefektorisolut, mukaan lukien syöttösolut, basofiilit ja eosinofiilit, jotka ovat kriittisiä vieraiden aineiden ja antigeenien eliminaation kannalta, ovat tärkeimpiä tulehdustekijöitä. Erityisesti syöttösolut ovat keskeisiä allergista astmaa aiheuttavia soluja, ja astmaa sairastavien syöttösolujen määrä on merkittävästi koholla . Allergeenien stimulaation jälkeen syöttösolut erittävät autakoidivälittäjiä histamiinia, prostaglandiinia (PG) D2 ja leukotrieenia (LT) C4, jotka kykenevät aiheuttamaan keuhkoputkien supistumisen, limanerityksen ja limakalvon turvotuksen, kaikki astman ominaisuudet . Basofiilit degranuloivat histamiinin välitöntä vapautumista varten, tuottavat nopeasti LTC4: ää ja tuottavat Th2-sytokiineja. basofiilit voivat aiheuttaa välittömiä yliherkkyysoireita. Basofiilien lisääntynyt määrä on yleistä anafylaktisen reaktion aikana . Siten efektorisolujen määrän vähentäminen vähentää anafylaksian aineellista perustaa ja voi estää allergisten reaktioiden perustavaa kehitystä.
Anti-FceRI Fab-konjugoitu celastrol-kuormitettu polymeerimissi
Celastroli on tripterygium wilfordii-bakteerista (Ukkosjumalavine) uutettu bioaktiivinen yhdiste, joka voi aiheuttaa T-solujen apoptoosin . Siten kohdistaminen celastrol erityisesti syöttösoluihin tavalla, joka myös vähentää sen myrkyllisyyttä, on houkutteleva potentiaalinen väylä allergisten sairauksien hoitoon. Tähän lähestymistapaan on pyritty liittämällä selastroli anti-FceRI Fab: hen, jonka on osoitettu indusoivan syöttösolujen apoptoosia, poistavan niillä niiden tulehdusta edistävän tekijän lastin ja rajoittavan celastrolin toksisuutta . Allergisen astman hoito mallihiirillä anti-Fceria Fab-konjugoiduilla polymeerisilla miselleillä on osoitettu vähentävän nopeasti tulehdustekijöiden eritystä ja eosinofiilien infiltraatiota ja johtavan ovalbumiinin aiheuttamien allergisten tulehdusoireiden oireiden lievenemiseen . Kyky anti-FceRIa Fab-konjugoitu celastrol-ladattu polymeeriset misellit sekä estää IgE sitoutuminen syöttösolujen ja indusoida syöttösolujen apoptoosi tekee siitä erittäin houkutteleva lääke tyypin I allergisia sairauksia sekä muita syöttösolujen liittyviä sairauksia.
Anti-FceRIa Fab-konjugoitujen polymeeristen misellien on osoitettu vähentävän allergisia reaktioita tehokkaammin kuin omalitsumabin. Suotuisan tehon taustalla voivat olla seuraavat biokemialliset tekijät: 1) farmakokinetiikan laajentaminen polymeerisillä miselleillä; (2) lääkeaggregaation edistäminen kohdekudoksissa ja kohdesoluissa; ja (3) kilpaileva sitoutuminen fceri: n kanssa syöttösolujen pinnalla, mikä vähentää syöttösolujen degranulaatiota.
synteettinen sytotoksinen T-lymfosyytteihin liittyvä proteiini 4 (CTLA4), joka on fuusioitunut FCE
CTLA4 (alias CD152) on proteiinireseptori, joka toimii immuunitarkastuspisteenä ja alentaa immuunivastetta. Se ilmaistaan konstitutiivisesti CD4+CD25+Foxp3 + – säätelevissä T-soluissa, mutta on yläsäätelevä vain tavanomaisessa t-solusuponiaktivaatiossa. CTLA4 on homologinen T-solun kostimuloivan proteinCD28: n kanssa, ja molemmat molekyylit sitoutuvat cd80(B7-1) ja CD86(B7-2) antigeenia esitteleviin soluihin . Se sitoo CD80: n ja CD86: n suuremmalla affiniteetilla ja aviditeetilla kuin CD28, jolloin se pystyy syrjäyttämään CD28: n ligandeillaan . CTLA4 lähettää T-soluihin inhiboivan signaalin, kun taas CD28 lähettää stimuloivan signaalin .
tutkijat ovat rakentaneet fuusioproteiinin, joka sisältää CTLA-4: n CD80/CD86-sitovan domeenin ja IgE H-ketjun FCE-reseptoreita sitovan domeenin . Tämä rekombinanttiproteiini sitoutuu sekä FCERI/FCERII-että CTLA-4-reseptoreihin (CD80 ja CD86), jolloin th2-vasteet vaimenevat. CTLA4 Fcɛ ja CD23-CD80/CD86 yhdistyvät muodostaen monimolekyylisen polymeerin, joka toimii välikappaleena vaikuttaen liukoisen CD23: n tuotantoon. Kokeessa, jossa käytettiin ihmisen perifeerisen veren mononukleaarisolunäytteitä, joita stimuloitiin in vitro, ctla4 Fcɛ vähensi lymfosyyttien proliferaatiota lektiinikonspanavaliinin läsnä ollessa.; samassa kokeessa ctla4 Fcɛ: n osoitettiin myös sitovan efektorisolujen IgE-reseptoreita vaikuttaen siten liukoiseen CD23-biosynteesiin ja estäen lymfosyyttien proliferaatiota . Rekombinantti fuusioproteiini CTLA4Fcɛ voi olla tehokas lääke IgE-välitteisen immuunipuutoksen ja muiden siihen liittyvien sairauksien hallintaan .
kohdentaminen IgE+ B-solut
IgE+ B-solut ovat kriittisiä IgE-tuotannon kontrolloimiseksi. IgE+ B-solut vaikuttavat sekä veriplasman erittämään ohimenevään IgE: hen että luuytimessä plasmasolujen erittämään pitkäikäiseen IgE: hen .
Quilitsumabi (h47H4)
B-lymfosyyttien pinnalla oleva kalvoon sitoutunut IgE on erittäin tärkeä IgE-tuotannon kannalta. Siinä on ylimääräinen 52 aminohapon pituinen cemx-pituinen fragmentti IgE: n CH4-domeenin ja sen B-solukalvoa ankkuroivan segmentin välissä . CemX on IgE-synteesiin sitoutuneiden B-solujen antigeenisitoutumispaikka . CemX on sekä kohde-että solukohtainen, joten se sopii hyvin lääkekohteeksi.
Genentech®: n kehittämä Quilitsumabi on uusi keinotekoinen monoklonaalinen vasta-aine, joka kohdistaa Cemx: n IgE+ B-soluihin. Se tuottaa B-solujen kalvoon sitoutuneiden IgE-antigeenireseptoreiden ristisitoutumista, joka indusoi IgE+ B-solujen apoptoosin, jolloin vapaiden IgE-pitoisuudet pienenevät ja IgE+ B-solujen muodostuminen estyy . Koska vapaan IgE: n puoliintumisaika on melko lyhyt, tämä lääke on tehokas keino vähentää IgE: tä poistamalla solut, jotka ilmentävät membraani IgE: tä .
vaiheen II kliininen tutkimus osoitti, että quilitsumabi on tehokas ehdokas allergisten sairauksien turvallisessa ja spesifisessä hoidossa . Quilitsumabin osoitettiin alentavan kokonais-IgE: tä ja spesifistä IgE: tä astmapotilaiden seerumissa, ja tämä vaikutus kesti 6 kuukautta . Quilitsumabin toivotaan olevan hyödyllinen joidenkin IgE-välitteisten sairauksien hoidossa ja ehkäisyssä, erityisesti niiden, joihin ei ole olemassa nykyisiä lääkkeitä . Quilitsumabihoidosta ei kuitenkaan ollut kliinisesti merkittävää hyötyä allergisille astmapotilaille, joiden hoitotasapaino ei ollut riittävän hyvä tavanomaisella hoidolla, vaikka quilitsumabihoidolla pystyttiin alentamaan seerumin IgE-arvoja ja siedettävyysprofiili oli hyvä .
Bispecific (BSC) IgE-CD3-vasta
IgE+ B-soluja on useita eri tyyppejä, kuten plasmapurkauksia, plasmasoluja ja IgE+ memory B-soluja . Varhaisimmassa IgE + B-solujen eliminointiin tähtäävässä kokeessa pyrittiin erityisesti muokkaamaan t-solureseptoreita yhdessä anti-IgE-monoklonaalisen vasta-ainetoiminnan kanssa . Bsc-IgE / CD3-vasta-aine on keinotekoisesti muunneltu kohdistusaine, joka on spesifinen sekä IgE: lle että CD3: lle. Se sitoutuu erityisesti soluihin, jotka ilmentävät kalvoon sitoutunutta IgE: tä ja voi ohjata ihmisen T-solujen sytotoksisuuden uudelleen IgE+ B-soluihin ainakin in vitro aiheuttamatta syöttösolujen degranulaatiota tai vapaan IgE: n vapautumista. Bsc-IgE / CD3 on vasta-aine, joka voi eliminoida sekä IgE+ B-solut että vapaan IgE: n seerumista . Siksi bsc-IgE / CD3 on uuden luokan ehdokaslääke IgE-välitteisiin allergisiin sairauksiin.
XmAb7195
FcyRIIß osallistuu B-solujen homeostaasiin ja fcyriißin poikkeavuudet johtavat autoimmuunisairauksiin . Uusi vasta tunnetaan XmAb7195 tuotettiin humanization, affinity kypsytys, ja Fc engineering käyttäen hiiren anti-IgE vasta mallina . XmAb7195 voi eristää vapaan IgE: n seerumissa muodostaen immuunikomplekseja B-solujen fcyriiß-ja IgE-reseptoreiden kanssa, jotka estävät IgE+ B-solujen muodostumista ja vähentävät vapaita ja kokonais-IgE-tasoja vaikuttamatta muiden B-solujen antigeeni-isotyyppeihin . XmAb7195 voi estää IgE + B-solujen erilaistumista, mikä vähentää IgE: tä erittävien plasmasolujen määrää. Tätä luotettavaa kaksoismekanismia voidaan käyttää IgE: n kokonaistasojen pienentämiseen, kun taas jäljellä olevaa vapaata IgE: tä voidaan kohdistaa jatkuvasti ja tehokkaasti. Faasin I kliininen tutkimus (NCT02148744) osoitti, että XmAb7195 vähentää IgE-aktiivisuutta tehokkaammin kuin omalitsumabi .