Microbiologie -004 – Méthode de la plaque d’étalement

La méthode de la plaque d’étalement est une technique permettant de plaquer un échantillon liquide contenant des bactéries afin que les bactéries soient faciles à compter et à isoler. Une plaque de propagation réussie aura un nombre dénombrable de colonies bactériennes isolées réparties uniformément sur la plaque.

La méthode de la plaque étalée utilise un outil appelé épandeur de plaque (ou bâton de hockey). Pour stériliser un épandeur de plaques, arrosez-le d’abord d’éthanol. Ensuite, passez-le brièvement dans la flamme d’un brûleur Bunsen et laissez soigneusement brûler l’éthanol. Le but est seulement de brûler l’éthanol; ne tenez pas l’épandeur de plaque dans la flamme. Tenir l’épandeur de plaques à l’écart de la cartouche d’éthanol et laisser tout l’alcool brûler, en prenant soin de ne pas laisser l’éthanol enflammé tomber sur le dessus de la paillasse.

À l’aide d’une pipette, transférer un volume mesuré d’un échantillon liquide contenant des bactéries et le distribuer sur une plaque fraîche. Passez immédiatement à l’épandage du liquide; ne le laissez pas reposer sur la plaque pendant que vous distribuez d’autres échantillons.
Stériliser un épandeur de plaques et le toucher à la surface de la gélose, à l’écart du liquide distribué, pour le refroidir. Pour répartir le liquide distribué autour de la plaque, poussez doucement l’épandeur de plaque d’avant en arrière. Utilisez votre autre main pour tenir le couvercle au-dessus de la plaque et faire tourner la plaque pour obtenir une répartition uniforme. Continuez à vous étendre jusqu’à ce que le liquide ait formé une couche uniforme à la surface du support. Remplacez le couvercle.

La plaque à tartiner est prête à incuber. Si votre plaque de propagation a réussi, après l’incubation, vous devriez avoir isolé des colonies dénombrables réparties uniformément sur la surface de la plaque.

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