c Methylating Agents
これまでに議論された化合物とは対照的に、UV照射に対する特定の菌株と単官能アルキル化剤MMSの交差感受性は、DNA中のチミン二量体を認識する同じエンドヌクレアーゼによる切除可能な損傷の同様の認識によるものではないようである。 MMSに感受性の細菌変異体の存在は、野生型における修復機構の存在のためのprima facie証拠であるが、それは今、それは修復機構によって認識されるアルキ ＭＭＳ処理後、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓは、ＤＮＡ中の一本鎖切断の形成によって不活性化され、野生型ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓが修復できることが示された（Ｓｔｒａｕｓｓ ａｎｄ Ｗａｈｌ，１ ９ ６ ４；Ｐｒａｋａｓｈ ａｎｄ Ｓｔｒａｕｓｓ，１ ９ ７ ０）；しかし、ＭＭＳ感受性変異体は、この能 さらに、観察された紫外線またはx線に対する交差感受性は、これらの後者の薬剤によって形成されることが知られている一本鎖切断の形成によ
この観点の確認は、紫外線照射には感受性であるがMMSには感受性ではない枯草菌変異体の特性から得られた（Searashi and Strauss,1965）。 DNA塩基のメチル化は、むしろMMS誘導鎖切断よりも、Bの任意の切除修復を呼び起こすことはありません。 枯草はまた、いくつかの細胞世代の間に野生型または感受性細胞のDNAからのメチル基の有意な損失を観察する失敗によって明らかに実証された。 この知見は、メチル化されたＤＮＡを複製する細胞の能力を示し、アリールアルキル化によって修飾されたＤＮＡの複製能力と一致する（ＶｅｎｉｔｔおよびＴａｒｍｙ、１ ９ ７ ２）。
BにおけるMMS誘発メチル化損傷の修復に関する上記の研究。 したがって、ｓｕｂｔｉｌｉｓは、Ｅ．ｃｏｌｉ Ｂ／ｒにおける単官能メチル化剤ＭＮＮＧ（Ｌａｗｌｅｙ ａｎｄ Ｏｒｒ，１ ９ ７ ０）によって導入されたアルキル化損傷の修復に関する他の研究と対比され得る。 この製品だけでなく、3-メチルアデニンとおそらくいくつかの未確認の製品（紙クロマトグラム上の起源材料）は、成長とDNA合成の両方を可能にする条件下で大腸菌B/r細胞のDNAからN−7-メチルグアニンの損失と比較して選択的に切除されるようである。 3-メチルアデニンとO6–メチルグアニンではなく、起源材料もBs-1細胞から切除されたが、おそらく減少した速度であった。 Mnng処理されたB/rおよびBs-1細胞の生存に違いがあったかどうかは、LawleyおよびOrrによって述べられておらず、切除能力のそのような違いは、細胞生存を助 しかし、Ｋｏｎｄｏ ｅ ｔ ａ ｌ． (1970)は、mmsと比較して、mnngで処理した後、ピリミジン二量体を切除することができない株について、大腸菌において致死率の増加または変異頻度の増加を報告していない。 これは、ＭＮＮＧによるＤＮＡのアルキル化が、ＭＭＳによるＤＮＡのアルキル化によって生成されるよりも、Ｏ６−メチルグアニンの量の２ ０倍を生成するという事実にも, 1971–1972).
3-メチルアデニンおよびO6-メチルグアニンのこの”損失”が、UVエンドヌクレアーゼとは異なる酵素切除機構によって媒介されるという証拠は、大腸菌から単離されたエンドヌクレアーゼIIと呼ばれる酵素の特性に関するin vitro研究から来ている（Friedberg and Goldthwait、1969）。 この酵素は、アルキル化剤MMSと反応したDNA中のホスホジエステル結合を破壊し、DNA中の脱プリン化部位を認識することができる。 より最近では、発癌物質MNUによってメチル化されたDNAからO6-メチルグアニンおよびN3-メチルアデニンを放出するが、N7-メチルグアニンは放出しないことが示された(Kirtikar and Goldthwait,1974)。 エンドヌクレアーゼＩＩは明らかに多くの異なる機能を有しており，その一つは特定の置換プリンに結合したグリコシド結合を切断することができると思われる。 一方、それはおそらく酵素の混合物である可能性がある。 同様にこの仮定されたN-グリコシド結合の切断を行うことができる酵素（したがってN-グリコシダーゼと呼ばれる）の存在は、最近、大腸菌から単離され、DNA含有 得られた脱プリン化部位は、次に、別の関連する酵素系によって認識され、修復され得る（ｃｆ． VerlyおよびPaquette、1972）。 大腸菌調製物の特異性は、3-アルキルアデニンについても観察されているが、Papirmeisterらによって7-アルキルアデニンについては観察されていない。 (1970). Ｎ−エチル−Ｎ−ニトロソウレアの反応によって形成されたＤＮＡ中の３−エチルアデニンおよびＯ６−エチルグアニン残基は同様にｅ．ｃｏｌｉ ＷＰ２ＤＮＡから切除され プリンアルキル化のマイナーな生成物の切除は、現在、in vivoで哺乳類細胞で観察されており、さらに、特定の組織における切除能力の低下は、いくつかのアルキ
Prakash and Strauss(1970)およびLawley and Orr(1970)の研究によって示されているように、修復機構によるDNA中のn7-アルキルグアニン残基の認識および切除の明らかな欠如は、Kimball et al. （１ ９ ７ １ａ）インフルエンザ菌におけるＭＭＳおよびＭＮＮＧの影響について。 したがって、この同じ残留物がユーグレナグラシリスで認識されるように見えることはやや驚くべきことである。 Ｎ−メチル−Ｎ−ニトロソ−ｐ−トルエンスルホン酸によるメチル化の後、７−メチルグアニンは、１ ０時間の半減期でＤＮＡから失われた（ＯｌｓｏｎおよびＭｃｃａｌｌａ、１ ９ ６ ９）が、これは、クエン酸−リン酸緩衝液中のｐＨ７．, 1973). さらに、耐性変異株は、細胞上清中の分解されたＤＮＡからの単核種の出現とともに、感受性株よりも迅速にＮ−７−メチルグアニンを切除した（ＯｌｓｏｎおよびＭｃｃａｌｌａ、１ ９ ６ ９）。 したがって、この予想外の発見は、さらなる調査に値する。 これらの知見は、その後、Margisonらによって指摘されたin vivoでのラット肝臓DNAからの7-メチルグアニンのより速い損失のわずかな指標と一緒に。 Craddock(1973a)によるものではないが、このDNA置換基が特定の状況下で修復酵素によって認識され得ることを示唆している可能性がある。
表VIは、細菌DNAからの化学生成物の損失の前述の例をまとめたものである。