概要
Ligustrum vicaryi L.はLigustrum ovalifolium Hasskの雑種です。 var. aureo-marginatumおよびLigustrum vulgale L.、Oleaceaeファミリーに属する。 それはしばしばその黄金の葉のために装飾用の低木として使用されます。 しかし、その医学的価値はまだ発見されていません。 近年、植物多糖類は、免疫調節活性および抗酸化活性を含む生物学的性質のために、包括的な注目を集めている。 本研究は、抽出、精製、およびLigustrum vicaryi l.果実から多糖類を特徴付けると、その免疫調節および抗酸化活性を調査することを目的としました。 超音波抽出，エタノール沈殿，マクロポーラス樹脂分離，透析バッグ精製により，Ｌｉｇｕｓｔｒｕｍｖｉｃａｒｙｉｌ．果実多糖類（ＬＶＦＰ）を得た。 ＬＶＦＰの物理化学的性質をＦｏｕｒｉｅｒ変換赤外分光法，高速イオンクロマトグラフィーおよび高速ゲルろ過クロマトグラフィーを用いて明らかにした。 その結果、LVFPはラムノース、アラビノース、ガラクトース、グルコースから1.79:7.55:4.58:1.54の比で構成され、その分子量は88,949Daであったことが示された。 シクロホスファミド（ｃ Ｙ）誘導免疫抑制マウスモデルを用いてＬＶＦＰの免疫調節活性と抗酸化活性を調べた。 結果は、LVFPが有意に脾臓および胸腺インデックスを増加させ、好中球の貪食機能を強化し、bおよびTリンパ球を活性化し、IL-10およびTNF-αの血清レベ さらに，ＬＶＦＰはスーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）とグルタチオンペルオキシダーゼ（ＧＳＨ-ｐ ｘ）レベルを増加させることによりＣ Ｙ誘発性肝障害を軽減することを観察した。 これらの結果は，ＬＶＦＰが免疫調節活性および抗酸化活性を有することを示唆し，医薬品および機能性食品産業におけるＬＶＦＰの適用の基礎を築くことを示唆した。
1. はじめに
免疫調節剤は、予防または治療戦略として使用することができ、宿主の防御応答を増強または抑制することができる。 免疫調節および抗酸化機能を有する天然物は、自己免疫疾患、炎症性障害および癌を含むいくつかの疾患を治療するために広く使用されている。 最近、合成化学療法剤の使用に対する安価で毒性の低い天然物への関心が高まっている。
Ligustrum vicaryi L.はLigustrum ovalifolium Hasskのハイブリッドである。 var. aureo-marginatumおよびLigustrum vulgale L.、Oleaceaeファミリーに属する。 それはクロロフィルレス表現型を提示し、その黄金の葉のために園芸低木として広く使用されています。 ガス交換特徴およびクロロフィルの蛍光性の応答に従って、Ligustrum vicaryi L.はSO2に抵抗でき、Cd汚染された土のphytostabilizationにこうして使用することができる。 Ligustrum vicaryi L.に高い装飾用および環境保護の価値があるが、治療上の潜在性はまだ解明されるべきである。
植物多糖類は、伝統的な薬草に一般的に見られる重要な生物学的高分子のクラスであり、抗酸化、免疫調節、抗老化、抗腫瘍および抗炎症活性を含む 近年、植物多糖類の抽出および生物活性分析に特化した多くの研究が行われている。 植物果実多糖類は、ナツメ多糖類、柿多糖類、およびスイカ多糖類を含む、最も一般的に研究されている。 我々の知る限りでは、Ligustrum vicaryi l.果実多糖類（LVFPs）の調製および生物活性に基づく研究は報告されていない。＜6782＞＜7947＞本研究では、ＬＶＦＰを抽出精製した。 次に、ＬＶＦＰの分子量および単糖組成を分析した。 さらに，ＬＶＦＰの生物学的機能をシクロホスファミド（Ｃ Ｙ-）誘導免疫抑制マウスモデルで評価した。 その結果，ＬＶＦＰは自然免疫と適応免疫の両方を活性化することにより免疫調節能を有することが示された。 さらに，ＬＶＦＰはスーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）とグルタチオンペルオキシダーゼ（ＧＳＨ-ｐ ｘ）を増加させることにより抗酸化活性を示した。 本研究は、免疫関連疾患の代替治療薬としてLVFPを開発するための理論的基礎を提示した。
2. 材料および方法
2.1. 動物福祉および倫理的声明
すべての実験手順は、ARRIVE(animal research:reporting in vivo experiments)ガイドラインの勧告に準拠しています。 済寧医科大学の施設動物ケアと使用委員会は、手順を承認しました。 すべての実験手順は可能な限り人道的に実施した。 合計100人の健康な雄昆明マウス20-25gの重量を量る12時間の暗い光の人工サイクルを維持する条件で収容された、食品と水利用可能なアドリビタム。 動物は標準的な動物室に収容され、温度は20-22℃、湿度は55-60％であった。
2.2. 多糖類の抽出および精製
Ligustrum vicaryi L. 果実は、Jining Medical University（中国山東省日照市）の植物園から得られ、Jianan Wang（医学植物学者、School of Pharmacy、Jining Medical University）によって同定された。 乾燥したLigustrum vicaryi L.果実を粉砕し、40メッシュのふるいを通してふるいにかけた。 粉末をアセトンに浸漬し（粉末とアセトンの比は１：３であった）、脂質を除去するために２ ４時間振盪した。 上清を廃棄し、残りをオーブンで乾燥させた。 多糖類を、蒸留水８：１（ｖ／ｗ）で５ ０℃で８ ０分間、２ ５ ０Ｗの超音波パワーを用いて抽出した。 水抽出物を綿を用いて濾過した。 残渣を、３ ０ ０ ０ｒｐｍで３分間遠心分離した後に除去した。 次に、濃縮された上清を７ ０％エタノールで沈殿させ、この処理を９ ５％エタノールで繰り返した。 上清を除去した後、蒸留水を加えて抽出物を溶解し、残渣を遠心分離により除去した。 顔料を除去するためにDM101マクロ多孔性樹脂を使用した。 セベージ試薬（クロロホルム/1-ブタノール、v/v=4 : 1)Coomassie Brilliant Blue G-250検出を用いて変色反応が観察されないまでタンパク質を除去するために使用した。 多糖類を凍結乾燥機に２ ４時間入れて、凍結粉末を得た。 多糖類中の小分子を透析バッグ（3500Daの分子カットオフ）を用いて二日間除去し、蒸留水を12時間ごとに交換した。 グルコース標準曲線を用いたアントロン-硫酸アッセイを用いてＬＶＦＰの純度を決定した。
2.3. フーリエ変換赤外線（FTIR）分析
LVFPを純粋な臭化カリウム粉末と混合し、瑪瑙モルタルに入れ、赤外線ランプの下で均一に粉砕した。 混合物を、フーリエ変換赤外分光計Ｉｒｔｒａｃｅｒ−１ ０ ０（Ｓｈｉｍａｄｚｕ，Ｊａｐａｎ）を使用して評価した。
2.4. 高速イオンクロマトグラフィー（HPIC）
HPIC分析のために、5mg LVFPを1mLの2mol/Lトリフルオロ酢酸に溶解し、加水分解のために121℃で2時間置いた。 次いで、0.45μ mの微多孔濾過膜を用いて濾過した。 単糖類のクロマトグラフィー分離は、CarboPac PA20カラムとパルスアンペア検出器を備えたICS-5000イオンクロマトグラフ上で行われた。 イオンクロマトグラフィー分離条件を調整し，八つの単糖標準（フコース，ラムノース，アラビノース，ガラクトース，グルコース，キシロース，マンノース，フルクトース）の混合物について試験した。 優れた分離は、0.5mL/分の一定流量で勾配溶出によって得られた。 移動相は、２ ５ ０ｍ ＭのＮａｏｈ（Ａ）、水（１ＭのＮａａｃ％、ｖ／ｖ、Ｂを含有する）、および水（Ｃ）からなる。 溶出は以下のようにして行った：2。0%Aで0≤21分;2.0%aおよび5.0%Bで21.1分;2.0%aおよび20%Bで21.1≤30分;および80%Aで30.1≤50分.
2.5. 高速ゲルろ過クロマトグラフィー（ＨＰＧＦＣ）＜９ ４ １ １＞＜７ ９ ４ ７＞多糖類分子量をＨＰＧＦＣ（Ｗａｔｅｒｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＵＳＡ）により分析し、ＲＩＤ（２ ４ １ ４屈折率検出器）およびＥｍｐｏｗｅｒ３ワークステーションを装備した。 クロマトグラフィーカラム：Ultrahydrogel™リニア、300mm×7.8mm×2、移動相：0.1M Nano3、流量：0.9mL/分、およびカラム温度：45℃であった。 試料を液相に溶解し、微多孔性濾過膜により濾過した。 検量線に使用した分子量基準は、ＭＷ１ ３ ５ ３ ５ ０、ＭＷ３ ６ ８ ０ ０、ＭＷ９ ７ ５ ０、ＭＷ２ ７ ０ ０、およびＭＷ１ ８ ０であった。
2.6. シクロホスファミド-（Cy-）誘導免疫抑制マウスモデルとLVFP投与
100マウスの合計は、ランダムに五つのグループに分けられた：コントロール、Cy、Cy+LVFP（100mg/kg/日）、Cy+LVFP（200mg/kg/日）、およびCy+LVFP（400mg/kg/日）。 対照群には正常な生理食塩水を投与し、他の四つの群にはCy（40mg/kg）を毎日七日間腹腔内注射した。 ＬＶＦＰは胃内投与により連続して七日間投与した。
2.7. 脾臓および胸腺指数の決定
すべてのマウスを秤量し、最後の薬物投与の24時間後に犠牲にした。 脾臓および胸腺を切除し、秤量した。 脾臓または胸腺指数は、体重に対する脾臓または胸腺重量の比として表された。
2.8. マウス好中球
黄色ブドウ球菌の食作用機能の決定は、好中球の食作用を評価するために使用されました。 手短に言えば、ＬＶＦＰ投与後にマウスから４ ０μ Ｌの血液を得、凝固を防止するためにヘパリン管に入れた。 次に、４ ０μ ｌの細菌懸濁液を上記の管に添加した。 次いで、混合物を２〜３滴のメタノールで５分間固定し、４〜５滴のＷｒｉｇｈｔ’ｓ ｓｔａｉｎで５分間染色した。 合計100個の好中球が観察され、記録された。 好中球貪食速度と好中球貪食指数は，好中球貪食速度＝貪食機能を示した好中球の数／好中球の総数と好中球貪食指数＝好中球に巻き込まれた細菌の総数／好中球の総数として計算した。
2.9. ELISAによる血清溶血素の測定
4日目に、ニワトリ赤血球（CRBC）懸濁液の5％をマウスに腹腔内注射した（0.1mL/10g）。 ７日目、ＬＶＦＰ投与の２時間後に、１ｍＬのマウス血液を得、１ ０分間遠心分離した。 次いで、４ ０μ ｌの血清を２ｍｌの正常生理食塩水に添加した。 1mLの10％モルモット血清および1mLの5％CRBC懸濁液を血清に加え、続いて37℃の水浴中で0.5時間インキュベーションした。 対応する光学密度値は、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ Ｍｋ３Ｅｎｚｙｍｅ Ｍａｒｋ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ（Ｗａｌｔｈａｍ，Ｍ Ａ，ＵＳＡ）によって検出された。
2.10. Tリンパ球形質転換速度の決定
二日目に、マウスは筋肉内にフィトヘマグルチニン（PHA）の8mg/kgを注入しました。 ＬＶＦＰ投与の２時間後の７日目に、眼窩後洞から４ ０μ Ｌの血液を採取し、スライド上に置き、４〜５滴のＷｒｉｇｈｔ染色で染色した。 過剰の染料を２ ０分後に水ですすいだ。 顕微鏡を用いて、１ ０ ０個の細胞を観察した。 形質転換リンパ球を以下のように計算した：リンパ球形質転換率＝形質転換リンパ球／リンパ球の総数。
2.11. 遅延型過敏症（DTH）応答
dth応答を耳の腫れの程度によって調べた。 一般的に、耳の腫れの程度は、炎症の程度を反映すると考えられている。 二日目に、1cm2の腹部毛をNa2Sを用いて除去し、腹部皮膚を25μ lの1-フルオロ-2,4-ジニトロベンゼン（DNFB）溶液で覆った。 第六日目に、右耳の皮膚を20μ lのDNFB溶液で被覆した。 ＬＶＦＰ投与の２時間後の７日目に、マウスを屠殺し、２つの耳を切除し、秤量した。 両耳の重量差は耳の腫れの程度を決定した。
2.12. 血清中のTNF-αおよびIL-10サイトカインの検出
LVFP投与後2時間、マウスの血液を眼窩後洞穿刺を用いて得、室温で15分間自然に凝固させた。 次に、血液を２ ０分間遠心分離し、上清を回収した。 上清中のＴＮＦ−αおよびＩＬ−１ ０を、ＥＬＩＳＡキット（Ｎａｎｇｉｎｇ Ｊｉａｎｃｈｅｎｇ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｎａｎｇｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）を使用して検出した。
2.13. スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）、グルタチオンペルオキシダーゼ（GSH-Px）、およびメタンジカルボン酸アルデヒド（MDA）レベルの検出
八日目に、マウスを犠牲にし、肝臓を抽出した。 粉砕および遠心分離の後、肝臓組織の上清を、ＳＯＤ、ＧＳＨ−ｐ ｘおよびＭＤＡの検出のために収集した。 ＳＯＤ、ＧＳＨ−ｐｘ、およびＭＤＡは、ＥＬＩＳＡキット（Ｎａｎｇｉｎｇ Ｊｉａｎｃｈｅｎｇ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｎａｎｇｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）を用いて測定した。
2.14. ヘマトキシリンおよびエオシン（Ｈ Ｅ）染色＜９ ４ １ １＞＜７ ９ ４ ７＞Ｈ Ｅ染色は既報の通り実施した。 八日目に、マウスを犠牲にし、肝臓組織を抽出し、10％中性緩衝ホルマリンに固定した。 パラフィンに埋め込んだ後、組織を5μ mの切片に切断した。 次に、スライドをＨ Ｅで染色し、形態学的変化を決定した。 画像を光学顕微鏡下で撮影した（Ｏｌｙｍｐｕｓ，Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａｎ）。
2.15. 統計分析
実験被験者/調製物を無作為にグループに割り当て、等しいグループサイズを得た。 グループの割り当て、データ記録、およびデータ分析は、研究者に開示されていませんでした。 データは、少なくとも５つの独立した実験からの平均±ＳＤとして示される。 ０（Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃ Ａ，ＵＳＡ）を使用した多重比較のために、Ｔｕｋｅｙの多重比較検定を伴う一方向Ａ ＮＯＶＡを使用し、統計的に有意であると考えた。
3. 結果
3.1. LVFP
のFTIRスペクトル分析LVFPは、アセトンを介した脂質除去、超音波抽出と組み合わせた温水、エタノール沈殿、マクロポーラス樹脂による色素除去、Sevage試薬による脱色、透析バッグによる小分子除去によってそれぞれ抽出された。 さらに，新規な多糖類構造を赤外分光法により特性化した。 LVFPのFTIRスペクトル解析を図1(a)に示します。 3345cm−1の特徴的な広いピークは、O-H（おそらくN-Hを含む）伸張振動に対応していた。 2929cm−1での吸収ピークは、C-H延伸振動吸収ピークと糖吸収ピークに対応していました。 1599cm−1での吸収は、-OHの曲げ振動モードを示した。 1412cm−1のピークは、C-H曲げ振動の存在に起因する。 さらに、1073cm−1での吸収は、アルコール性水酸基の形でC-Oストレッチの曲げ振動モードを示した。
3.2. ＬＶＦＰの単糖組成＜９ ４ １ １＞＜７ ９ ４ ７＞ＬＶＦＰの単糖組成をＨＰＩＣにより分析した。 図１（ｂ）および図１（ｃ）に示すように、多糖類中に存在する全ての単糖類は、単糖類標準の溶出時間に従って、標準曲線を参照して同定された。 LVFPは主にラムノース、アラビノース、ガラクトース、およびグルコースから1.79:7.55:4.58:1.54のモル比で構成されていた。
3.3. HPGFCによるLVFPの分子量の決定
LVFPの分子量はHPGFCによって検出された。 デキストランス（分子量: 180、2700、9750、368000、および135350Da）は、水溶性であり、広い範囲の分子量で利用可能であるため、標準として使用された。 この規格は、LVFPのサイズを推定するためのガイドラインを提供しました。 標準曲線を得た（y=-0.523x+13.01、R2=0.995）。 その結果、ＬＶＦＰの分子量は８ ８，９ ４ ９Ｄａであることが示された。
3.4. CY誘導免疫抑制マウスにおける胸腺および脾臓指数に対するLVFPの影響
CY誘導免疫抑制マウスモデルは、LVFPの免疫調節活性を調べるために確立され Cyは腹腔内注射（40mg/kg）として毎日七日間投与された。 Ｃｙ投与後，マウスは脱毛，低興奮，攻撃性，食欲不振，体重減少などの症状を示したが，対照群では明らかな変化は認められず，動物モデルが正常に確立されたことを示した。 Ｃｙ＋ＬＶＦＰ群に、異なる濃度のＬＶＦＰ（１ ０ ０、２ ０ ０、および４ ０ ０ｍｇ／ｋｇ／日）を７日間連続して投与した。 脾臓および胸腺の指標は、生物の免疫機能を反映する。 CY誘導免疫抑制マウスにおける胸腺および脾臓指標に対するLVFP効果を図2に示す。 対照群と比較して，Ｃｙ群は胸腺およびひ臓指数の有意な減少を示した。 ＬＶＦＰ投与は用量依存的にこれらの指標を有意に増加させた。 これらの結果から，ＬＶＦＰは免疫器官に影響を与えて免疫を増強することが示唆された。
(a)
(a))
(b))
(a)
(b)
(a)
(b))
3.5. CY誘導免疫抑制マウスにおける好中球食作用に対するLVFPの影響
好中球は、侵入する微生物に対する効果的な防御である。 食作用は、病原体を殺す好中球のための重要な戦略です。 好中球の活性化を調べるために貪食速度と貪食指数を調べた。 図3に示すように、対照群と比較して、Cy群は食作用速度および食作用指数を有意に低下させており、免疫抑制状態を示唆していた。 LVFP（200mg/kgおよび400mg/kg）投与は、これらの変化を有意に軽減した。 これらの結果から，ＬＶＦＰは好中球の貪食機能を増強できることが示唆された。
(a)
(a))
（b）)
(a)
(b))
3.6. CY誘導免疫抑制マウスにおける体液性免疫および細胞性免疫に対するLVFPの影響
体液性免疫は、体が腫瘍および感染症と戦うために重要である。 血清溶血素レベルは、体液性免疫応答を評価するために使用することができる。 血清溶血素はＣ Ｙ処理により減少し，この変化は用量依存的にＬＶＦＰにより有意に減衰した（図４（ａ））。 血液からの様々な抗原は、Tリンパ球を活性化することができる。 ＰＨ Ａは、ｔ細胞の活性化および増殖を誘発するためのマイトジェンとして作用することができる。 Ｔリンパ球形質転換アッセイは，ＬＶＦＰの存在下または非存在下でｐｈａ刺激後のマウス血液を用いて行った。 図４（ｂ）に示されるように、ＬＶＦＰの３用量全ては、Ｔリンパ球形質転換速度のＣｙ誘発性低下を著しく阻害した。 ＤＴＨ応答は、Ｔ細胞媒介性免疫応答である。 耳の腫脹の程度を測定することにより、ＤＴ Ｈ応答を評価した。 ＬＶＦＰの３回の用量は全て、耳の腫脹度においてＣｙ誘発阻害を著しく減衰させた（図４（ｃ））。 これらの結果から，ＬＶＦＰはＢリンパ球およびＴリンパ球を活性化できることが示唆された。
(a)
(a))
(b))
(c)
(c))
(a)(b)
(b)(c)
(c)
(c)
(b)(c)
(c)
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3.7. CY誘導免疫抑制マウスの血清中のIL-10およびTNF-αの発現に対するLVFPの影響
免疫細胞によって分泌されるサイトカインは、宿主防御に重要な役割を果 ＩＬ−１ ０およびＴＮＦ−αは、重要な炎症性メディエーターである。 ＥＬＩＳＡを実施して、ＩＬ−１ ０およびＴＮＦ−αの血清発現に対するＬＶＦＰの効果を確認した。 我々の結果は、IL-10およびTNF-α発現は、Cy処理後、有意に減少したことを示した。 ＬＶＦＰ投与は用量依存的にＩＬ−１ ０およびＴＮＦ−αレベルを増加させた（図５）。
(a)
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（b）)
(a)
(b)
(a)
(b))
3.8. CY誘発免疫抑制マウスにおける酸化ストレスに対するLVFPの影響
さらに、本研究では、LVFPがCy誘発酸化ストレスおよび肝障害を軽減するかどうかを調 SODはh2O2およびO2に遊離基誘発の損傷を防ぎ、中和するために極度の酸化物の陰イオンを変えます。 ＧＳＨ-ｐ ｘは細胞膜の過酸化破壊に対する重要な内因性防御であると推定された。 MDAは脂質過酸化の最終生成物であり、肝臓組織における酸化的損傷を反映することができる。 図６（ａ）〜６（ｃ）は、ＣＹ処置後の肝臓組織におけるＭＤＡレベルの増加を伴う、ＳＯＤおよびＧＳＨ−ｐｘ発現の有意な減少を示す。 ＬＶＦＰの投与は用量依存的にＳＯＤおよびＧＳＨ-ｐ ｘレベルを増加させ，ＭＤＡレベルを減少させた。 次に、ｈ Ｅ染色を用いて肝臓形態の変化を評価した。 図6(d)に示すように、Cy群では、肝細胞はまばらであり、核核と無秩序であった。 肝類洞は赤血球で満たされていた。 予想通り，ＬＶＦＰ群の肝細胞は対照群に匹敵する明確な核小体を有する整然とした方法で配列した。 その結果，ＬＶＦＰはＣ Ｙによって誘発される酸化ストレスと肝障害を減衰させることが示唆された。
(a)
(a))
(b))
(c))
(d)
(d))
(a)
(b)(c)
(c)(d)
(d)
(d)(d)(d)(d)(d)(d)(d)(d)(d)(d)
4. 考察
本研究では、Ligustrum vicaryi l.果実から多糖類を抽出し、その免疫調節活性および抗酸化活性を評価した。 多糖類は、超音波抽出、エタノール沈殿、アセトンによる脂肪除去、DM101マクロポーラス樹脂による色素除去、Sevage試薬（クロロホルム/1-ブタノール、v/v=4：1）による脱 さらに、この多糖類構造は、赤外分光法、HPGFC-RID、およびHPICによって特徴付けられた。 その結果、LVFPの分子量は88,949Daであり、LVFPはラムノース、アラビノース、ガラクトース、グルコースの4つの単糖からなり、モル比は1.79:7.55:4.58:1.54であることが示された。
免疫抑制は一時的または永続的な免疫機能不全の状態であり、生物を病原体に対してより敏感にする可能性があります。 新しい免疫調節剤の開発は、免疫抑制性疾患の予防および治療のための最も効果的な方法の一つである。 例えば、化学療法薬と組み合わせた免疫調節剤は、癌治療において有用であると思われる。 いくつかの報告は、免疫調節作用と多糖類との間に正の相関を示している。 Ayeka et al. 甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch. 多糖類は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋免疫細胞集団の活性化、ならびにＩＬ−２、ＩＬ−６およびＩＬ−７などの種々のサイトカインの産生の増加を介して明らかな免疫調節 Chen et al. Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ ｓｐｈｅｎａｎｔｈｅｒａおよびＳｃｈｉｓａｎｄｒａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓからの単離された多糖類; これらの抽出物は、マクロファージの貪食活性を高め、体の免疫を改善することができる。 ＳｃｈｉｓａｎｄｒａｐｈｅｎａｎｔｈｅｒａおよびＳｃｈｉｓａｎｄｒａｐｈｉｎｅｎｓｉｓ由来の多糖類は，主にアラビノース，グルコースおよびガラクトースから構成され，ＬＶＦＰの組成と同様であることが観察された。 ＬＶＦＰが免疫調節機能を有するかどうかを調べるために，Ｃｙ誘導免疫抑制マウスモデルを確立した。 Cyは化学療法剤であり、免疫抑制動物モデルを確立するために使用されてきた。 免疫器官のレベルでは，ＣＹ誘発免疫抑制マウスにおけるｌｖｆｐはひおよび胸腺指数を有意に増加させることが示唆された。 免疫細胞レベルでは，ＬＶＦＰは好中球の貪食機能を増強し，ｂおよびＴリンパ球活性化を促進することが観察された。 これらのデータは、ＬＶＦＰが自然免疫および適応免疫の両方を増強することができることを示している。＜6782＞＜7947＞さらに、血清中の免疫関連サイトカインも調べたところ、LVFPはIL-10およびTNF-αレベルを増加させることが示された。 伝えられるところによると、いくつかのタイプの多糖類は、炎症因子の発現に影響を及ぼす可能性がある。 Chen et al. 糸状微細藻類Tribonema spから硫酸化多糖類が観察された。 マクロファージにおけるIL-6、IL-10、およびTNF-αの発現を増強することができる。 Cheng et al. 野生のLactarius deliciosusからの多糖類がマクロファージのTNF-α、IL-1βおよびIL-6の分泌を増加させたことを報告した。 Wang et al. 臍苔癬からの多糖類は、マウスマクロファージにおけるTNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-6、およびIL-10の放出を誘導することを報告した。＜6782＞＜7947＞酸化防止剤は、人体の酸化を抑制する物質です。 通常、活性酸素種の生産と正常な代謝に不可欠である抗酸化防御システムとの間のバランスがあります。 細胞は余分な遊離基を抑制するためにSODおよびGSH-pxのようなある内生酸化防止剤を作り出します。 Ｃｙ誘発免疫抑制マウスにおけるＬＶＦＰの抗酸化活性を決定した。 その結果，ＬＶＦＰはＳＯＤおよびＧＳＨ-ｐ ｘ発現の有意な増加を示した。 さらに、ＬＶＦＰは、肝臓における酸化的損傷の指標であるＭＤＡ発現を減少させた。 Ｈ ｅ染色は，ＬＶＦＰがＣｙによって誘発される肝細胞損傷を緩和できることを示した。 したがって、ＬＶＦＰは、ＳＯＤおよびＧＳＨ−ｐｘなどの抗酸化物質の産生を増強することによって、酸化ストレス誘発性損傷から細胞を保護する可能性があると結論 これまでの研究では、単糖組成物中のラムノース、アラビノース、ガラクトースの含有量が抗酸化活性に影響を与える可能性があることが示されています。 LVFPのラムノース、アラビノースおよびガラクトースの内容はLVFPによって示されるより強い酸化防止活動のために重要であるかもしれないより高いです。
全体として、Ligustrum vicaryi l.果実からの多糖類を抽出し、それらの物理的および生物学的特性を調べた。 LVFPは、免疫抑制疾患における治療的使用のための潜在的な免疫調節および抗酸化剤として探索され、伝統的な中国医学の国際市場への導入を可能に
5. 結論
結論として、LVFPは88,949Daの分子量でLigustrum vicaryi l.果実から抽出され、精製され、四つの単糖、すなわちラムノース、アラビノース、ガラクトース、グルコースから成っていた。 予備薬理学的研究は、LVFPが免疫機能を効果的に改善し、抗酸化活性を有することを示した。 この研究は、LVFPが医薬品治療のための有望な免疫調節剤および抗酸化剤であり得ることを実証している（図7）。
データの入手可能性
この研究の結果を支持するために使用されたTIFデータは、要求に応じて対応する著者から入手可能です。
利益相反
著者らは、この論文の出版に関して利益相反はないと宣言している。
謝辞
この作業は、中国国家自然科学財団（81800399）、済寧医科大学博士研究スタートアップ基金、国家レベルの大学生のイノベーションと起業家精神CX2016011/Cx2019092）。