Abstrakt
Ligustrum vicaryi L. Er en hybrid Av Ligustrum ovalifolium Hassk. var. aureo-marginatum Og Ligustrum vulgale L., som tilhører Familien Oleaceae. Det brukes ofte som en prydbusk på grunn av sine gyldne blader. Imidlertid er den medisinske verdien ennå ikke oppdaget. Nylig har plantepolysakkarider tiltrukket omfattende oppmerksomhet på grunn av deres biologiske egenskaper, inkludert immunmodulerende og antioksidantaktiviteter. Denne studien tok sikte på å trekke ut, rense og karakterisere polysakkaridet Fra Ligustrum vicaryi l. frukt og undersøke dets immunmodulerende og antioksidantaktiviteter. Ligustrum vicaryi L. fruktpolysakkarid (LVFP) ble oppnådd ved ultralydutvinning, etanolutfelling, makroporøs harpiksseparasjon og dialysepose rensing. DE fysisk-kjemiske egenskapene TIL LVFP ble belyst ved Hjelp Av Fourier-transform infrarød spektrometri, høy ytelse ionekromatografi og høy ytelse gelfiltreringskromatografi. RESULTATENE indikerte AT LVFP besto av rhamnose, arabinose, galaktose og glukose i et forhold på 1,79 : 7,55 : 4,58 : 1,54, og dens molekylvekt var 88,949 Da. IMMUNMODULERENDE og antioksidantaktivitetene TIL LVFP ble undersøkt ved bruk av en cyklofosfamid – (Cy -) – indusert immunsupprimert musemodell. Resultatene viste at LVFP signifikant økte milt-og tymusindekser, forbedret fagocytisk funksjon av nøytrofiler, aktiverte b-og T-lymfocytter og oppregulerte serumnivåer AV IL-10 og TNF-α. VIDERE observerte VI AT LVFP lettet Cy-indusert leverskade ved å øke superoksiddismutase (SOD) og glutationperoxidase (GSH-px) nivåer. Disse resultatene antydet AT LVFP har immunmodulerende og antioksidantaktiviteter, og legger derfor grunnlag for ANVENDELSE AV LVFP i farmasøytisk og funksjonell næringsmiddelindustri.
1. Innledning
Immunmodulatorer kan brukes som forebyggende eller terapeutiske strategier, øke eller undertrykke vertsforsvarets respons. Naturlige produkter med immunmodulerende og antioksidantfunksjoner er mye brukt til å behandle flere sykdommer, inkludert autoimmun sykdom, inflammatorisk lidelse og kreft . Nylig har det vært økende interesse for billige og mindre giftige naturlige produkter over bruk av syntetiske kjemoterapeutiske midler.
Ligustrum vicaryi L. Er en hybrid Av Ligustrum ovalifolium Hassk. var. aureo-marginatum Og Ligustrum vulgale L., som tilhører Familien Oleaceae . Den presenterer en klorofyllfri fenotype og er mye brukt som hagebruk busk på grunn av sine gyldne blader. Ifølge gassutvekslingsegenskapene og klorofyllfluorescensresponser, Kan Ligustrum vicaryi L. motstå SO2 og kan dermed brukes til fytostabilisering Av Cd-forurenset jord . Selv Om Ligustrum vicaryi L. har høy dekorativ og miljøvernverdi, er dets terapeutiske potensial ennå ikke klarlagt.
Plantepolysakkarider, en klasse av viktige biologiske makromolekyler som vanligvis finnes i tradisjonelle medisinske urter, utviser en rekke biologiske aktiviteter, inkludert antioksidant, immunmodulerende, antiaging, antitumor og antiinflammatorisk aktivitet . I de senere år har det vært mange studier dedikert til utvinning og bioaktivitetsanalyse av plantepolysakkarider. Plante frukt polysakkarider er de mest undersøkte, inkludert jujube polysakkarider, persimmon polysakkarider og vannmelon polysakkarider . Så vidt vi vet, er det ikke rapportert en studie basert På preparering Og bioaktivitet Av Ligustrum vicaryi L. fruktpolysakkarider (LVFPs).
I denne studien BLE LVFP ekstrahert og renset. Deretter ble molekylvekten og monosakkaridblandingen av LVFP analysert. VIDERE ble DE biologiske funksjonene TIL LVFP vurdert i en cyklofosfamid – (Cy -) – indusert immunsupprimert musemodell. RESULTATENE viste AT LVFP har immunmodulerende evne ved å aktivere både medfødt og adaptiv immunitet. VIDERE viste LVFP antioxidantaktivitet ved å øke superoksiddismutase (SOD) og glutationperoxidase (GSH-px). Denne studien presenterte et teoretisk grunnlag for Å utvikle LVFP som et alternativt terapeutisk middel for immunrelaterte sykdommer.
2. Materialer og Metoder
2.1. Dyrevelferd Og Etiske Uttalelser
alle eksperimentelle prosedyrer fulgte ANBEFALINGENE FRA ARRIVE (animal research: reporting in vivo experiments) retningslinjer . Institutional Animal Care And Use Committee of Jining Medical University godkjente prosedyrene. Alle eksperimentelle prosedyrer ble utført så humant som mulig. Totalt 100 friske mannlige Kunming-mus som veide 20-25 g ble plassert ved forhold som opprettholdt 12 h av en mørk-lys kunstig syklus, med mat og vann tilgjengelig ad libitum. Dyrene ble plassert i standard dyrerom, med en temperatur på 20-22°C og fuktighet på 55-60%.
2.2. Ekstraksjon Og Rensing Av Polysakkarid
Ligustrum vicaryi L. frukt ble hentet fra den botaniske hagen Til Jining Medical University (Rizhao, Shandong, Kina) og identifisert Av Jianan Wang (Medisinsk Botaniker, School Of Pharmacy, Jining Medical University). Tørket Ligustrum vicaryi l. frukt ble pulverisert og siktet gjennom en 40-mesh sil. Pulveret ble nedsenket i aceton (forholdet mellom pulver og aceton var 1 : 3) og ristet i 24 timer for å fjerne lipider. Supernatanten ble kastet, og restene ble tørket i ovnen. Polysakkaridet ble ekstrahert med destillert vann 8: 1 (v / w) ved 50°C i 80 min ved hjelp av en ultralydseffekt på 250 W. Vannekstraktet ble filtrert ved hjelp av bomull. Resten ble fjernet etter sentrifugering ved 3000 rpm i 3 min. Deretter ble den konsentrerte supernatanten utfelt med 70% etanol, og denne prosessen ble gjentatt med 95% etanol. Etter at supernatanten ble fjernet, ble destillert vann tilsatt for å oppløse ekstraktet, og resten ble fjernet ved sentrifugering. DM101 makroporøs harpiks ble brukt til å fjerne pigmentet. Sevage reagens (kloroform/1-butanol, v / v = 4 : 1) ble brukt til å fjerne proteinet til ingen misfargingsreaksjon ble observert Ved Bruk Av Coomassie Brilliant Blue G-250 deteksjon. Polysakkaridene ble plassert i en frysetørker i 24 timer for å oppnå det frosne pulveret. De små molekylene i polysakkaridet ble fjernet ved å bruke en dialysepose (molekylær cutoff på 3500 Da) i to dager, og destillert vann ble erstattet hver 12. time. Kolonnekromatografi Sephadex G-200 ble brukt til å rense LVFP. Anthron-svovelsyreanalysen, med en glukosestandardkurve, ble brukt til å bestemme renheten TIL LVFP.
2.3. Fourier-Transform Infrarød (FTIR) Analyse
LVFP ble blandet med rent kaliumbromidpulver, og blandingen ble plassert i en agatmørtel og malt jevnt under en infrarød lampe. Blandingen ble vurdert ved Hjelp Av Fourier-transform infrarød spektrometer IRTracer-100 (Shimadzu, Japan).
2.4. Høyytelses Ionekromatografi (HPIC)
for hpic-analyse ble 5 mg LVFP oppløst i 1 mL 2 mol/L trifluoreddiksyre og plassert ved 121°C i 2 timer for hydrolyse. Deretter ble blandingen filtrert ved bruk av en 0,45 µ mikroporøs filtreringsmembran. Den kromatografiske separasjonen av monosakkarider ble utført PÅ ICS-5000 ionkromatograf utstyrt med En CarboPac PA20 kolonne og puls ampere detektor. Separasjonsbetingelsene for ionekromatografi ble justert og testet for en blanding av åtte monosakkaridstandarder (fukose, rhamnose, arabinose, galaktose, glukose, xylose, mannose og fruktose). En overlegen separasjon ble oppnådd ved gradienteluering med en konstant strømningshastighet på 0,5 mL / min. Den mobile fasen besto av 250 Mm NaOH (A), vann (inneholdende 1 M NaAc%, v/v, B) og vann (C). Elueringen ble utført som følger: 2.0% A ved 0∼21 min; 2.0% A og 5.0% b ved 21.1 min; 2.0% A og 20% b ved 21.1∼30 min; og 80% A ved 30.1∼50 min.
2.5. Høyytelses Gelfiltreringskromatografi (HPGFC)
polysakkaridmolekylmassen ble analysert AV HPGFC (Waters, New York, USA) og utstyrt med RID (2414 refractive index detector) og Empower 3 arbeidsstasjon. De kromatografiske forholdene var som følger: kromatografisk kolonne: Ultrahydrogel™ Lineær, 300 mm × 7.8 mm × 2, mobil fase: 0.1 M NaNO3, strømningshastighet: 0.9 mL / min og kolonnetemperatur: 45°C. Prøven ble oppløst i væskefasen og filtrert av en mikroporøs filtreringsmembran. Molekylvektstandarder som ble brukt for kalibreringskurven var MW135350, MW36800, MW9750, MW2700 og MW180.
2.6. Cyklofosfamid – (Cy -) Indusert Immunsuppressiv Musemodell Og LVFP-Administrasjon
totalt 100 mus ble tilfeldig delt inn i fem grupper: kontroll, cy, CY + LVFP (100 mg/kg/dag), Cy + LVFP (200 mg/kg/dag) og CY + LVFP (400 mg/kg / dag). Kontrollgruppen ble administrert normalt saltvann, og de andre fire gruppene ble intraperitonealt injisert Med Cy (40 mg/kg) hver dag i syv dager. LVFP ble administrert ved intragastrisk administrasjon i syv påfølgende dager.
2.7. Bestemmelse Av Milt-Og Tymusindekser
alle mus ble veid og ofret 24 h etter siste legemiddeladministrasjon. Milten og thymus ble skåret ut og veid. Milt-eller tymusindeksen ble uttrykt som forholdet mellom milt-eller tymusvekt og kroppsvekt.
2.8. Bestemmelse Av Fagocytisk Funksjon Av Mus Nøytrofiler
Staphylococcus aureus ble brukt Til å vurdere fagocytose av nøytrofiler. Kort sagt ble 40 µ blod oppnådd fra mus etter LVFP-administrering og plassert i et heparinrør for å forhindre koagulasjon. Deretter ble 40 µ bakteriell suspensjon tilsatt til ovennevnte rør. Blandingen ble jevnt belagt på glassglass og opprettholdt ved romtemperatur i 0,5 timer. deretter ble blandingen festet med 2-3 dråper metanol i 5 min og farget med 4-5 dråper wrights flekk i 5 min. Totalt 100 nøytrofiler ble observert og registrert. Den nøytrofile fagocytiske frekvensen og den nøytrofile fagocytiske indeksen ble beregnet som følger: nøytrofile fagocytiske frekvensen = antall nøytrofile som viste fagocytisk funksjon/totalt antall nøytrofile og nøytrofile fagocytiske indeksen = totalt antall bakterier som hadde blitt oppslukt av nøytrofile / totalt antall nøytrofile.
2.9. Bestemmelse Av Serumhemolysin ved ELISA
på den fjerde dagen ble 5% av en SUSPENSJON av kyllingrøde blodceller (CRBC) injisert intraperitonealt i musene (0,1 mL/10 g). På den syvende dagen, 2 h etter LVFP-administrering, ble 1 mL musblod oppnådd og sentrifugert i 10 min. Deretter ble 40 µ serum tilsatt til 2 mL vanlig saltvann. En mL 10% marsvin serum og 1 mL 5% CRBC suspensjon ble tilsatt til serumet, etterfulgt av inkubasjon i et vannbad ved 37°C for 0,5 h. blandingen ble sentrifugert, og supernatanten ble plassert i en 96-brønnskulturplate. Den tilsvarende optiske tetthetsverdien ble detektert av Thermo Scientific Multiskan MK3 Enzyme Mark instrument (Waltham, MA, USA).
2.10. Bestemmelse Av T-Lymfocytttransformasjonshastighet
på den andre dagen ble musene intramuskulært injisert 8 mg / kg fytohemagglutinin (PHA). På den syvende dagen, 2 timer etter LVFP-administrasjon, ble 40 µ blod samlet fra retroorbital sinus, plassert på et lysbilde og farget med 4-5 dråper wrights flekk. Overflødig fargestoff ble skyllet med vann etter 20 min. Ved hjelp av et mikroskop ble 100 celler observert. De transformerte lymfocyttene ble beregnet som følger: lymfocytttransformasjonshastighet = transformerte lymfocytter / totalt antall lymfocytter.
2.11. Forsinket Type Hypersensitivitet (DTH) Respons
DTH respons ble undersøkt med tanke på graden av hevelse i øret. Generelt, graden av øret hevelse antas å reflektere graden av betennelse . DTH-respons ble målt som følger: på den andre dagen ble 1 cm2 bukhår fjernet Ved Bruk Av Na2S og bukhuden ble dekket med 25 µ av 1-fluor-2,4-DINITROBENZEN (DNFB) – oppløsning. På den sjette dagen ble huden på høyre øre belagt med 20 µ AV DNFB-oppløsning. På den syvende dagen, 2 h etter LVFP-administrasjonen, ble musene ofret og de to ørene ble skåret ut og veid. Vektforskjellen mellom de to ørene bestemte graden av ørevelling.
2.12. Påvisning AV TNF – α Og IL-10 Cytokiner I Serum
på den syvende dagen, 2 timer etter LVFP-administrering, ble musens blod oppnådd ved bruk av en retroorbital sinuspunktur og naturlig koagulert i 15 min ved romtemperatur. Deretter ble blodet sentrifugert i 20 min, og supernatanten ble samlet. Tnf-α OG IL-10 i supernatanten ble oppdaget ved HJELP AV ELISA-sett (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, Kina).
2.13. Påvisning Av Superoksiddismutase (SOD), Glutationperoksidase (GSH-Px) Og Metandikarboksylaldehyd (MDA) Nivåer
på den åttende dagen ble musene ofret og leverene ble ekstrahert. Etter sliping og sentrifugering ble supernatanten av levervev samlet for påvisning av SOD, GSH-px og MDA. SOD, GSH-px og MDA ble målt ved HJELP AV ELISA-sett (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, Kina).
2.14. Hematoksylin og EOSIN (HE) Flekker
han flekker ble utført som tidligere rapportert . På den åttende dagen ble musene ofret og levervev ble ekstrahert og festet i 10% nøytral-bufret formalin. Etter innebygging i parafin ble vevene kuttet i 5 µ. Deretter ble lysbildene farget MED HAN for å bestemme morfologiske endringer. Bilder ble fotografert under et lysmikroskop (Olympus, Tokyo, Japan).
2.15. Statistisk Analyse
Eksperimentelle fag/preparater ble randomisert til grupper, og like gruppestørrelser ble oppnådd. Gruppeoppgaver, dataregistrering og dataanalyse ble ikke offentliggjort til utprøveren. Data vises som gjennomsnittlig ± SD fra minst fem uavhengige eksperimenter. Enveis ANOVA ledsaget Av tukeys multiple sammenligningstest ble brukt til flere sammenligninger ved Hjelp Av GraphPad Prism versjon 6.0 (GraphPad Software, La Jolla, CA, USA) , og ble ansett som statistisk signifikant.
3. Resultater
3.1. FTIR Spektrumanalyse AV LVFP
LVFP ble ekstrahert ved lipidfjerning via aceton, varmt vann kombinert med ultralydutvinning, etanolutfelling, pigmentfjerning ved makroporøs harpiks, deproteinering med Sevage-reagenset og fjerning av små molekyler med henholdsvis en dialysepose. Videre ble den nye polysakkaridstrukturen preget av infrarød spektroskopi. FTIR-spektrumanalysen AV LVFP er vist I Figur 1 (a). Den karakteristiske brede toppen på 3345 cm-1 korresponderte Med O-H (kanskje Inkludert Nh) strekkvibrasjon. Absorpsjonstoppen på 2929 cm-1 korresponderte Med C-H strekk vibrasjonsabsorpsjonstoppen og sukkerabsorpsjonstoppen. Absorpsjonen ved 1599 cm-1 indikerte bøyningsvibrasjonsmodusene TIL-OH. Toppet ved 1412 cm-1 skyldes tilstedeværelsen Av C-H bøyevibrasjon. Videre indikerte absorpsjonene ved 1073 cm−1 bøyningsvibrasjonsmodusene For C – o som strekker seg i alkoholisk hydroksylgruppeform.
3.2. Monosakkaridsammensetningen AV LVFP
MONOSAKKARIDSAMMENSETNINGENE AV LVFP ble analysert VED HPIC. Som vist I Figur 1 (b) og 1 (c) ble alle monosakkarider som finnes i polysakkarider identifisert i henhold til elueringstiden for monosakkaridstandardene, med henvisning til en standardkurve. LVFP var hovedsakelig sammensatt av rhamnose, arabinose, galaktose og glukose i molarforholdet 1,79 : 7,55 : 4,58 : 1,54.
3.3. Bestemmelse AV Molekylvekt AV LVFP VED HPGFC
MOLEKYLVEKTEN TIL LVFP ble detektert AV HPGFC. Dekstraner (molekylvekt: 180, 2700, 9750, 368000 Og 135350 Da) ble brukt som standarder siden de er vannløselige og tilgjengelige i et bredt spekter av molekylære masser. Standardene ga retningslinjer for å estimere STØRRELSEN PÅ LVFP. En standardkurve ble oppnådd (y = -0,523 x + 13,01, R2 = 0,995). Resultatene viste at MOLEKYLVEKTEN TIL LVFP var 88,949 Da.
3.4. EFFEKTER AV LVFP På Thymus Og Miltindekser Hos Cy-Induserte Immunsuppressive Mus
Den Cy-induserte immunsuppressive musemodellen ble etablert for å undersøke IMMUNMODULERENDE aktivitet AV LVFP. Cy ble administrert som en intraperitoneal injeksjon (40 mg/kg) hver dag i syv dager. Etter fem dager Med Cy-administrasjon viste musene symptomer som hårtap, lav spenning, aggresjon, dårlig appetitt og vekttap, mens ingen åpenbar endring ble observert i kontrollgruppen, noe som indikerer at dyremodellen ble vellykket etablert. Cy + LVFP-gruppene fikk forskjellige konsentrasjoner AV LVFP (100, 200 og 400 mg/kg/dag) i syv påfølgende dager. Milt og thymus indekser reflekterer immunfunksjonene til organismen . LVFP-effektene på thymus-og miltindeksene i Cy-induserte immunsuppressive mus er vist I Figur 2. Sammenlignet med kontrollgruppen viste Cy-gruppen en signifikant reduksjon i tymus-og miltindekser. ADMINISTRERING AV LVFP økte disse indeksene betydelig på en doseavhengig måte. Disse resultatene antydet AT LVFP kunne påvirke immunorganene for å forbedre immuniteten.
(a)
(b)
(a)
(b)
3.5. EFFEKTER AV LVFP På Nøytrofil Fagocytose Hos Cy-Induserte Immunsuppressive Mus
Nøytrofiler er et effektivt forsvar mot invaderende mikroorganismer . Fagocytose er en nøkkelstrategi for nøytrofiler i å drepe patogener . Fagocytisk hastighet og fagocytisk indeks ble undersøkt for å undersøke aktivering av nøytrofiler . Som vist i Figur 3, sammenlignet med kontrollgruppen, Hadde Cy-gruppen signifikant redusert fagocytisk hastighet og fagocytisk indeks, noe som tyder på en immunsuppressiv status. ADMINISTRERING AV LVFP (200 mg/kg og 400 mg/kg) lindret disse endringene betydelig. Disse resultatene antydet AT LVFP kan forbedre fagocytisk funksjon av nøytrofiler.
(a)
(b)
(a)
(b)
3.6. EFFEKTER AV LVFP På Humoral Immunitet Og Cellulær Immunitet Hos Cy-Induserte Immunsuppressive Mus
Humoral immunitet er kritisk for kroppen å bekjempe svulster og infeksjoner. Serumhemolysinnivået kan brukes til å evaluere humoral immunrespons . Serumhemolysinet ble redusert ved Cy-behandling, og denne endringen ble signifikant svekket av LVFP på en doseavhengig måte(Figur 4 (a)). En rekke antigener fra blod kan aktivere T-lymfocytter. PHA kan fungere som et mitogen for å utløse aktivering og spredning Av T-celler . T-lymfocytttransformasjonsanalysen ble utført ved bruk av museblod etter pha-stimulering i NÆRVÆR eller fravær AV LVFP. Som vist i Figur 4 (b) hemmet ALLE tre DOSENE AV LVFP markant Den Cy-induserte reduksjonen Av t-lymfocytttransformasjonshastigheten. DTH-responsen er En T-celle-mediert immunrespons . DTH-responsen ble vurdert ved å måle graden av ørehevelse. Alle tre dosene AV LVFP svekket Signifikant Cy-indusert hemming i ørehevelsesgraden (Figur 4(c)). Disse resultatene antydet AT LVFP kan aktivere b-og T-lymfocytter.
(a)
(b)
(c)
(a)
(b)
(c))
3.7. EFFEKTER AV LVFP på EKSPRESJON AV IL-10 og TNF-α I Serum Fra Cy-Induserte Immunsuppressive Mus
Cytokiner utskilt av immunceller spiller viktige roller i vertsforsvaret . IL-10 og TNF-α er viktige inflammatoriske mediatorer . ELISA ble utført for å fastslå EFFEKTEN AV LVFP på serumuttrykket AV IL-10 og TNF-α. Våre resultater viste at IL-10-og TNF-α etter Cy-behandling var signifikant redusert. DOSEAVHENGIG ADMINISTRERING AV LVFP økte IL-10-og tnf-α (Figur 5).
(a)
(b)
(a)
(b)
3.8. EFFEKTER AV LVFP på Oksidativt Stress Hos Cy-Induserte Immunsuppressive Mus
videre undersøkte denne studien om LVFP lettet Cy-indusert oksidativt stress og leverskade. SOD omdanner superoksidanionen TIL H2O2 Og O2 for å forhindre og nøytralisere den frie radikalinduserte skaden . GSH-px antas å være et viktig endogent forsvar mot peroksidativ ødeleggelse av cellemembranen . MDA er sluttproduktet av lipidperoksydasjon og kan reflektere oksidativ skade i levervevet . Figur 6 (a) -6 (c) viser signifikant redusert SOD – og GSH-px-uttrykk, med økte mda-nivåer i levervevet etter Cy-behandling. Administrasjon AV LVFP doseavhengig økte SOD-og GSH-px-nivåene og reduserte MDA-nivået. Deretter ble endringene i levermorfologi vurdert ved HJELP AV HAN-farging. Som vist i Figur 6 (d), I Cy-gruppen, var leverceller sparsomme og uordnede med den pyknotiske kjernen. De hepatiske sinusoider var fulle av røde blodlegemer. Som forventet var leverceller i LVFP-gruppen ordnet på en ordnet måte med en klar nukleolus, sammenlignbar med de i kontrollgruppen. Resultatene indikerte AT LVFP kunne dempe oksidativt stress og leverskade indusert Av Cy.
(a)
(b)
(c)
(d)
(a)
(b)
(c)
(d))
4. Diskusjon
i denne studien ble et polysakkarid ekstrahert Fra Ligustrum vicaryi l.-frukten, og dets immunmodulerende og antioksidantaktiviteter ble vurdert. Polysakkaridet ble ekstrahert ved varmt vann kombinert med ultralydutvinning, etanolutfelling, fettfjerning ved aceton, pigmentfjerning ved DM101 makroporøs harpiks, deproteinering med Sevage-reagenset (kloroform/1-butanol, v/v = 4 : 1) og fjerning av små molekyler ved hjelp av henholdsvis dialyseposen. Videre ble denne polysakkaridstrukturen preget av infrarød spektroskopi, HPGFC-RID og HPIC. Resultatene indikerte at MOLEKYLVEKTEN TIL LVFP er 88,949 Da, OG LVFP består av fire monosakkarider, nemlig rhamnose, arabinose, galaktose og glukose i molforholdet 1,79 : 7,55 : 4,58 : 1,54.
Immunsuppresjon Er en tilstand av midlertidig eller permanent immun dysfunksjon og kan gjøre en organisme mer følsom for patogener. Utvikling av nye immunmodulerende midler er en av de mest effektive metodene for forebygging og behandling av immunosuppressive sykdommer . For eksempel ser immunmodulerende midler kombinert med kjemoterapi ut til å være nyttige i kreftbehandling . Flere rapporter har indikert positive korrelasjoner mellom immunmodulerende tiltak og polysakkarider. Ayeka et al. vist at lakris (Glycyrrhiza uralensis Fisch.) polysakkarid har immunmodulerende effekter tydelig gjennom aktivering AV CD4+ og CD8 + immuncellepopulasjoner og økt produksjon av forskjellige cytokiner, SOM IL-2, IL-6 og IL-7 . Chen et al. isolerte polysakkarider Fra Schisandra sphenanthera Og Schisandra chinensis; disse ekstraktene kan forbedre fagocytisk aktivitet av makrofager og forbedre kroppens immunitet . Det ble observert at polysakkaridene Fra Schisandra sphenanthera og Schisandra chinensis hovedsakelig var sammensatt av arabinose, glukose og galaktose, tilsvarende SAMMENSETNINGEN AV LVFP. For å undersøke om LVFP hadde immunmodulerende funksjoner, ble Det etablert En Cy-indusert immunsupprimert musemodell. Cy er et kjemoterapeutisk middel og har blitt brukt til å etablere immunosuppressive dyremodeller . På nivået av immunorganer indikerte resultatene at LVFP signifikant økte milt og tymusindekser i Cy-induserte immunosuppressive mus. På nivået av immunceller ble det observert AT LVFP forbedret fagocytisk funksjon av nøytrofiler og fremmet b Og T lymfocyttaktivering. Disse dataene indikerer AT LVFP kan forbedre både medfødt og adaptiv immunitet.
videre ble immunrelaterte cytokiner i serum også undersøkt, og resultatene indikerte AT LVFP økte IL-10-og TNF-α-nivåene. Angivelig kan flere typer polysakkarider påvirke uttrykket av inflammatoriske faktorer. Chen et al. observert at sulfaterte polysakkarider fra filamentøse mikroalger Tribonema sp. kan forbedre IL-6, IL-10 og TNF-α i makrofager . Cheng et al. rapportert at polysakkarider fra den Ville Laktarius deliciosus økte utskillelsen AV TNF-α, IL-1Β og IL-6 hos makrofager . Wang et al. rapportert at polysakkaridet fra Lavens Umbilicaria esculenta induserte frigivelsen AV TNF-α, IFN-γ, IL-1Β, IL-6 og IL-10 i murine makrofager .
Antioksidanter er stoffer som undertrykker oksidasjon i menneskekroppen. Vanligvis er det en balanse mellom produksjon av reaktive oksygenarter og antioksidantforsvar, noe som er uunnværlig ved normal metabolisme. Celler produserer noen endogene antioksidanter som SOD og GSH-px for å undertrykke overdreven frie radikaler . Denne studien bestemte ANTIOXIDANTAKTIVITETEN TIL LVFP i Cy-induserte immunosuppressive mus. Resultatene viste AT LVFP viste en betydelig økning i SOD og GSH-px uttrykk. VIDERE REDUSERTE LVFP MDA-uttrykket, noe som indikerer oksidativ skade i leveren. Han flekker indikerte AT LVFP kan lindre levercelleskader indusert Av Cy. DERMED kan DET konkluderes med AT LVFP kan beskytte celler mot oksidativ stress-indusert skade ved å øke produksjonen av antioksidanter som SOD og GSH-px. Tidligere forskning har vist at innholdet av rhamnose, arabinose og galaktose i monosakkaridblandingen kan påvirke antioxidantaktiviteten . Innholdet av rhamnose, arabinose og galaktose i LVFP er høyere, noe som kan være viktig for DEN sterkere antioksidantaktiviteten SOM LVFP viser.
samlet ble polysakkarider Fra Ligustrum vicaryi l. frukt ekstrahert og deres fysiske og biologiske egenskaper ble undersøkt. LVFP kan utforskes som et potensielt immunmodulerende og antioksidantmiddel for terapeutisk bruk i immunsuppressive sykdommer, noe som muliggjør innføring av tradisjonell Kinesisk medisin på det internasjonale markedet.
5. Konklusjoner
TIL slutt BLE LVFP ekstrahert og renset Fra Ligustrum vicaryi L. frukt med en molekylvekt på 88,949 Da og besto av fire monosakkarider, nemlig rhamnose, arabinose, galaktose og glukose. Foreløpige farmakologiske studier indikerte at LVFP effektivt kunne forbedre immunfunksjonene og hadde antioksidantaktivitet. DENNE studien viser AT LVFP kan være et lovende immunmodulerende og antioksidantmiddel for farmasøytiske terapier (Figur 7).
Datatilgjengelighet
TIF-dataene som brukes til å støtte funnene I denne studien, er tilgjengelige fra den tilsvarende forfatteren på forespørsel.
Interessekonflikter
forfatterne erklærer at det ikke er noen interessekonflikter angående publisering av dette papiret.
Anerkjennelser
dette arbeidet ble støttet Av National Natural Science Foundation Of China (81800399), Jining Medical University Doctoral Research Startup Fund, Fondet For Nasjonalt Nivå Studenter Innovasjon Og Entreprenørskap Opplæringsprosjekt (201610443011), Shandong Tradisjonell Kinesisk Medisin Vitenskap Og Teknologiutvikling Program (2019-0450), Og Jining Medical University Student Innovation Training Program (cx2016011/cx2019092).