21.1 Clavisora Lusitaniae Rodrigues de Miranda (1979)
Anamorf: Candida lusitaniae van Uden & do Carmo-Sousa
groei op YM-agar: na 3 dagen bij 25°C zijn de cellen subglobose, eivormig tot elongate, 2-6×3-10 µm, en komen afzonderlijk, in paren of in korte kettingen voor. De groei is boterachtig, wit tot crèmekleurig, glinsterend of af en toe dof en rugose.
groei in glucose-gistextractbouillon: soms kan de groei flocculent zijn.
Dalmau-plaatcultuur op maïsmeelagar: na 1 week bij 25°C zijn pseudohyphen overvloedig en goed ontwikkeld. Kolonies kunnen worden omzoomd met pseudohyphae.
vorming van ascosporen: Asci zijn meestal bilobaat, met een of twee, zelden drie of vier, knotsvormige ascosporen (Fig. 21.2). Bud-parent conjugatie is waargenomen bij één stam (Fig. 21.2 F). Wratten kunnen (Rodrigues de Miranda 1984a) of niet (Rodrigues de Miranda 1979) zichtbaar zijn door elektronenmicroscopie. De ascosporen worden kort na hun vorming uit de asci bevrijd. Bij sommige kruisen worden bolvormige tot eivormige ascosporen gevormd (Fig. 21.2 D). Overvloedige sporulatie treedt op 2-4 dagen bij 17-25°C na het mengen van culturen van compatibele paringstypes op 1% moutextract agar of YCBAS agar. Bijna alle isolaten zijn vruchtbaar.
figuur 21.2. Clavisora lusitaniae. A)SUB 79-257. 1×CBS 4413. B) Conjugatiebuizen en C) zygote CBS 6936×UWOPS 94-252.1. (D) eivormige ascosporen, G90-244,1×G90-207,5. Automictische stam MTCC 1001, e) geconjugeerde ascus; F) autogame ascus; G) bevloeide asci en verkleefde ascosporen. Bar = 5 µm. Lachance et al. (2003c), herdrukt met toestemming.
Fermentation
| Glucose | + |
| Galactose | v |
| Sucrose | v |
| Maltose | v |
| Lactose | − |
| Raffinose | − |
| Trehalose | v |
Growth (on Agar Media)
| Glucose | + |
| Inulin | − |
| Sacharose | +1 |
| Raffinose | − |
| Melibiose | − |
| Galactose | v |
| Lactose | − |
| Trehalose | + |
| Maltose | +1 |
| Melezitose | +1 |
| Methyl-α-d-glucoside | v |
| Oplosbaar zetmeel | − |
| Cellobiose | v |
| Salicine | +1 |
| l-Sorbose | + |
| l-Rhamnose | + |
| d-Xylose | + |
| l-Arabinose | − |
| d-Arabinose | v |
| d-Ribose | v |
| Methanol | − |
| Ethanol | + |
| Glycerol | + |
| Erythritol | − |
| Ribitol | +1 |
| Galactitol | − |
| Mannitol | + |
| Glucitol | +1 |
| myo-Inositol | − |
| dl-Lactate | v |
| Succinate | + |
| Citrate | v |
| d-Gluconate | v |
| d-Glucosamine | v |
| N-Acetyl-d-glucosamine | +1 |
| Hexadecane | v |
| Nitrate | − |
| Vitamin-free | − |
1 zelden negatief (bijv. stam uwops 92-308.1)
Additional Growth Tests and Other Characteristics
| Xylitol | + |
| 2-Keto-d-gluconate | + |
| d-Glucuronate | − |
| Glucono-δ-lactone | v |
| Amino acid-free | + |
| Nitrite | − |
| Ethylamine | + |
| Lysine | + |
| Cadaverine | + |
| 10% NaCl | + |
| 50% Glucose | v |
| Starch production | − |
| DBB | − |
| Gelatin | − |
| Casein | − |
| Tween 80 | v |
| Acid production | − |
| Cycloheximide 0.001% | +/w |
| 1% Azijnzuur | − |
| Groei op 30°C | + |
| de Groei bij 37°C | + |
CoQ: 8 (Yamada en Kondo 1973).
Mol% G+C: 45,1–45,7, vijf stammen, waaronder CBS 4413 en CBS 6936 (Bd: Lachance et al. 1986).
toetredingsnummers, typestam: D1/D2 LSU rRNA=U44817, SSU rRNA=AY497762. Allootype: D1 / D2 LSU rRNA = AY190538.
koolhydraten in cellen: Glucose en mannose (Suzuki en Nakase 1998).
complementaire paringstypen: CBS 6936, paringstype h+ en CBS 4413, paringstype h−.
Type stam: CBS 6936.
systematiek: Lachance and Phaff (1998a) vatte de beschikbare informatie over de variabiliteit van de soort in de assimilatie van L-rhamnose, citroenzuur en maltose samen. Een isolaat van geplet agave, UWOPS92-308.1, waarvan het lidmaatschap van de soort onlangs werd bevestigd (Lachance et al. 2003c), niet assimileren van sucrose, α-glucosiden, β-glucosiden, ribitol, glucono-δ-lacton en N-acetyl-glucosamine. Identificatie op basis van groeikenmerken is daarom onbetrouwbaar. In bijna alle gevallen wordt C. lusitaniae geïsoleerd in de vorm van haploïde stammen die alleen seksuele voortplanting ondergaan na vermenging met een compatibel paringstype. De twee paartypes lijken in de natuur gelijk verdeeld te zijn. Stam MTCC 1001 is uniek in het vermogen om asci op zichzelf te vormen, door een mengsel van isogame en bud–parent conjugatie. Het lidmaatschap van de soort wordt ondersteund door de D1/D2-sequentie, die identiek is aan die van het allootype. Ondanks de ontdekking van een automatische stam, wordt morfologische identificatie van C. lusitaniae het meest gemakkelijk bereikt door onbekenden te paren met stammen van bekende paringstypes (François et al. 2001). Helaas paart het allootype, CBS 4413, slecht. François et al. (2001) en Lachance et al. (2003c) geef lijsten van verschillende stammen en hun paringsefficiëntie.
de soort is verbazingwekkend polymorf in de grote subeenheid rDNA sequenties, die kunnen variëren met meer dan 30 substituties in het D2 domein (Lachance et al. 2003c). Er is echter geen correlatie tussen het vermogen om volwassen asci te vormen door paren en hun mate van sequentiedivergentie. Sommige haploïde stammen zijn heterogeen voor de variantopeenvolgingen, die erop wijzen dat dit een zeldzaam geval is waar een species substantieel polymorf is voor deze normaal geconserveerde marker. Hoe zo ‘ n polymorfisme tot stand kwam is niet duidelijk. Een plausibele verklaring is dat de soort allopatrisch werd opgesplitst in twee verschillende populaties voor voldoende tijd om de divergentie te laten plaatsvinden, maar zonder de ontwikkeling van een postzygotisch isolatiemechanisme. Hereniging van de populaties, mogelijk door continentale drift, zou dan de coëxistentie van de sequentievarianten in een enkele Mendeliaanse populatie mogelijk hebben gemaakt.Ecologie: de ecologische niche van C. lusitaniae is onduidelijk. Hoewel de gist in cactus voorkomt, kan het niet als cactofiel worden beschouwd, aangezien het slechts af en toe in bijna 2000 monsters is gemeld (Starmer et al. 1990). Verschillende stammen werden door P. F. Ganter uit necrotisch cactusweefsel in Antigua teruggevonden. Interessant is dat deze monsters geen C. opuntiae opleverden, zoals normaal van die habitat verwacht wordt. In een studie van gisten geassocieerd met agave gekweekt voor tequila productie, Lachance (1993b) vond C. lusitaniae de meest voorkomende soort in azijnrots aan de basis van bladeren in deze plant.
Biotechnologie: onbekend
Landbouw en voeding: onbekend
klinisch belang: Clavisora lusitaniae wordt regelmatig teruggevonden in klinische specimens, maar wordt niet beschouwd als een echte menselijke ziekteverwekker (Hurley et al. 1987). Het werd voor het eerst erkend als een opportunistisch infectieus organisme door Holzschu et al. (1979), en is sindsdien opgedoken in meer dan 100 exemplaren van patiënten die lijden aan immuundeficiënties (Gargeya et al. 1990). Een studie van 35 klinische isolaten (Merz et al. 1992) onthulde dat een significante hoeveelheid variatie in chromosoomgrootte van kloon aan kloon voorkomt. Deze stammen konden op basis van hun elektrokaryotypen worden ingedeeld in 15 groepen die overeenkomen met de 15 patiënten waaruit ze waren geïsoleerd.