21.1 Clavispora Lusitaniae Rodrigues de Miranda (1979)
Anamorph: Candida lusitaniae van Uden & do Carmo-Sousa
Crescimento em ágar YM: Depois de 3 dias a 25°C, as células são subglobose, ovóide, para alongar, 2 e 6×3 a 10 µm, e ocorrer isoladamente, em pares ou em cadeias curtas. O crescimento é butírico, branco a creme, brilhante ou ocasionalmente maçante e rugoso.
crescimento do caldo de extracto de levedura-glucose: Ocasionalmente, o crescimento pode ser floculente.
Dalmau plate culture on corn meal agar: After 1 week at 25 ° C, pseudohyphae are abundant and well developed. As colónias podem ser fringidas com pseudohyphae.
formação de ascósporos: Asci são geralmente bilobato, contendo um ou dois, raramente três ou quatro, clavato ascósporos (Fig. 21.2). Foi observada conjugação Bud-pai numa estirpe(Fig. 21.2 F). Verrugas (Rodrigues de Miranda 1984a) ou não (Rodrigues de Miranda 1979) podem ser visíveis por microscopia eletrônica. Os ascósporos são libertados dos asci logo após a sua formação. Em algumas cruzes, são formados ascósporos esféricos a ovóides(Fig. 21.2 D). A esporulação abundante ocorre 2-4 dias a 17-25 ° C após mistura de culturas de tipos compatíveis de acasalamento em ágar de 1% de extrato de malte ou ágar de YCBAS. Quase todos os isolados são férteis.
Figura 21.2. Clavispora lusitaniae. (A) SUB 79-257.1×CBS 4413. B) Tubos de conjugação e C) zigotos CBS 6936×UWOPS 94-252.1. D) ascósporos ovóides, G90-244.1×G90-207.5. Estirpe autógama MTCC 1001, (e) ascus conjugado; (F) ascus autogâmico; G) asci deliquescidas e ascósporos aglutinados. Bar = 5 µm. Lachance et al. (2003c), reprinted with permission.
Fermentation
| Glucose | + |
| Galactose | v |
| Sucrose | v |
| Maltose | v |
| Lactose | − |
| Raffinose | − |
| Trehalose | v |
Growth (on Agar Media)
| Glucose | + |
| Inulin | − |
| Sucrose | +1 |
| Raffinose | − |
| Melibiose | − |
| Galactose | v |
| Lactose | − |
| Trehalose | + |
| Maltose | +1 |
| Melezitose | +1 |
| Methyl-ona-d-glucoside | v |
| solúvel starch | − |
| Cellobiose | v |
| Salicin | +1 |
| l-Sorbose | + |
| l-Rhamnose | + |
| d-Xylose | + |
| l-Arabinose | − |
| d-Arabinose | v |
| D-Ribose | v |
| metanol | − |
| Ethanol | + |
| Glycerol | + |
| Erythritol | − |
| Ribitol | +1 |
| Galactitol | − |
| Mannitol | + |
| Glucitol | +1 |
| myo-Inositol | − |
| dl-Lactate | v |
| Succinate | + |
| Citrate | v |
| d-Gluconate | v |
| d-Glucosamine | v |
| N-Acetyl-d-glucosamine | +1 |
| Hexadecane | v |
| Nitrate | − |
| Vitamin-free | − |
1 raramente negativo (por exemplo, estirpe UWOPS 92-308.1)
Additional Growth Tests and Other Characteristics
| Xylitol | + |
| 2-Keto-d-gluconate | + |
| d-Glucuronate | − |
| Glucono-δ-lactone | v |
| Amino acid-free | + |
| Nitrite | − |
| Ethylamine | + |
| Lysine | + |
| Cadaverine | + |
| 10% NaCl | + |
| 50% Glucose | v |
| Starch production | − |
| DBB | − |
| Gelatin | − |
| Casein | − |
| Tween 80 | v |
| Acid production | − |
| Cycloheximide 0.001% | +/w |
| 1% Acético | − |
| Crescimento a 30°C | + |
| Crescimento a 37°C | + |
CoQ: 8 (Yamada e Kondo, 1973).
mol % G+C: 45.1-45.7, cinco estirpes, incluindo CBS 4413 e CBS 6936 (BD: Lachance et al. 1986).
números de adesão da sequência genética, estirpe do tipo: D1 / D2 LSU rRNA=U44817, SSU rRNA=AY497762. Alótipo: D1 / D2 LSU rRNA=AY190538.
hidratos de carbono celulares: Glucose e manose (Suzuki e Nakase 1998).
tipos complementares de acasalamento: CBS 6936, acasalamento tipo H+ e CBS 4413, acasalamento tipo h -.
estirpe Tipo: CBS 6936.
Systematics: Lachance and Phaff (1998a) sumaried the available information on the variability encountered in the species in the asimilation of l-rhamnose, citric acid and maltose. Um isolado de agave esmagado, UWOPS92-308.1, cujo membro na espécie foi recentemente confirmado (Lachance et al. 2003c), não conseguiu assimilar sacarose, α-glucosidos, β-glucosidos, ribitol, glucono-δ-lactona e N-acetil-glucosamina. A identificação baseada nas características de crescimento não é, portanto, fiável. Em quase todos os casos, C. lusitaniae é isolado sob a forma de estirpes haplóides que só passam por reprodução sexual após mistura com um tipo de acasalamento compatível. Os dois tipos de acasalamento parecem ser distribuídos igualmente na natureza. A estirpe MTCC 1001 é única na capacidade de formar asci por si só, através de uma mistura de conjugação isogâmica e bud–pai. A composição da espécie é suportada pela sequência D1/D2, que é idêntica à do alótipo. Apesar da descoberta de uma estirpe automatica, a identificação morfológica de C. lusitaniae é mais convenientemente conseguida através do acasalamento de incógnitas com estirpes de tipos de acasalamento conhecidos (François et al. 2001). Infelizmente, o allotype, CBS 4413, acasala mal. François et al. (2001) and Lachance et al. (2003c) provide lists of various strains and their matching eficiências.
a espécie é surpreendentemente polimórfica nas grandes sequências de ADNR de subunidades, que podem variar em mais de 30 substituições no domínio D2 (Lachance et al. 2003c). No entanto, não há correlação entre a capacidade de formar asci maduros por pares de acasalamento e sua extensão de divergência de seqüências. Algumas estirpes haplóides são heterogéneas para as sequências variantes, indicando que este é um caso raro em que uma espécie é substancialmente polimórfica para este marcador normalmente conservado. Como tal polimorfismo veio à existência não é claro. Uma explicação plausível é que a espécie foi alopatricalmente dividida em duas populações distintas por tempo suficiente para permitir a divergência ocorrer, mas sem o desenvolvimento de um mecanismo de isolamento pós-zigótico. A reunificação das populações, possivelmente através da deriva continental, teria permitido a coexistência das variantes da sequência em uma única população Mendeliana.Ecology: the ecological nicho of C. lusitaniae is ill-defined. Embora a levedura ocorra em cactos, não pode ser considerada cactofílica, tendo sido relatada apenas ocasionalmente em quase 2000 amostras (Starmer et al. 1990). Várias estirpes foram recuperadas do tecido necrótico de cacto em Antígua por P. F. Ganter. Curiosamente, estas amostras não produziram qualquer C. opuntiae como normalmente seria esperado a partir desse habitat. Num estudo de leveduras associadas ao agave cultivado para a produção de tequila, Lachance (1993b) descobriu que C. lusitaniae era a espécie mais abundante nos podos acético na base das folhas desta planta.
Biotecnologia: Desconhecido
Agricultura e alimentação: Desconhecido
importância Clínica: Clavispora lusitaniae é regularmente recuperados em amostras clínicas, mas não é considerado como um verdadeiro patógeno humano (Hurley et al. 1987). Foi reconhecido pela primeira vez como um organismo infeccioso oportunista por Holzschu et al. (1979), e desde então apareceu em mais de 100 espécimes de pacientes que sofrem de deficiências imunitárias (Gargeya et al. 1990). Um estudo com 35 isolados clínicos (Merz et al. 1992) revelou que uma quantidade significativa de variação nos tamanhos dos cromossomas ocorre de clone a clone. Estas estirpes poderiam ser atribuídas, com base nos seus electrocariótipos, a 15 grupos correspondentes aos 15 doentes dos quais tinham sido isolados.