DNA Replication & Transcription
In principle: Replicação do DNA é semi-conservador
H – obrigações do ‘unzip’, vertentes descontrair,
complementares de nucleotídeos adicionado existentes vertentes
Após a replicação, cada dupla-hélice tem um “velho” uma “nova” vertente
DNA não é o “Código Genético” para proteínas
informações no DNA deve primeiro ser transcritas em RNA
RNA mensageiro transcrição é da base de dados-complementares ao modelo fita de DNA
portanto, co-linear com sentido fita de DNA
DNA RNA sínteses ocorrer apenas em 5′ 3′ direção
a síntese de DNA em procariotas:
Nucleotídeos são adicionados simultaneamente para ambas as vertentes, mas
DNA cresce no 5′ 3′ direção ÚNICA
(online MGA2 animação)
Distinguir:
Replicação: a duplicação de um double-stranded DNA (dsDNA) molécula
uma exata cópia do existente molécula (cf. cópia xerox)
Synthesis: biochemical creation of a new single-stranded DNA (ssdNA) molecule
a base-complementary ‘copy’ of an existing strand (cf. silly putty cópia)
ocorre apenas na 5′ 3′ direção
lição de casa #5
a Síntese de DNA em procariotas
Formação de replicação garfo na Origem de Replicação
fornece dois single-stranded DNA modelo (ssDNA)
várias replicações garfos (replicons)
Síntese de RNA primer
Além de dNTPs pela DNA Polimerase (DNAPol III) em 3′ final, apenas
contínua síntese sobre a liderança vertente
descontínuo síntese sobre lagging strand
fragmentos de Okazaki
proof-reading por 3′5′ exonuclease atividade
líder lagging strand síntese simultaneamente
Um único, dimeric DNAPol III replica vertentes
Excisão de RNA cartilha DNAPol I
laqueadura (ligação) do fragmento termina às lacunas pela DNA ligase
a síntese de DNA em eucariotas
genomas Eucarióticos são muito maiores do
eucarióticas síntese de DNA é mais eficiente:
Mais DNAPol moléculas, menor taxa de síntese, mais replicons em vários cromossomos
Transcrição: a síntese de RNA mensageiro (mRNA) (on-line MGA2 animação)
o Que é um Gene “”
o RNA transcrito a partir do DNA ao RNA Polimerase (RNAPol I)
(1) o Reconhecimento de transcrição unidade: ~ ‘gene’
Promotores de curtas sequências de DNA que regulam a transcrição de
normalmente ‘upstream’ = ‘para a esquerda’ a partir de 5′ fim do sentido da vertente
(2) Iniciação Alongamento
mRNA sintetizado 5′3′ da fita molde de DNA
mRNA sequência, portanto, homólogo ao DNA sentido vertente
Colinear: o mRNA e o DNA sentido strand “line up”
(em procariotas, mas não eucariotas: veja abaixo)
Processo semelhante ao da replicação do DNA , exceto
Sem primer é necessário
Transcrição pode ocorrer a partir de qualquer vertente
Mais DNA não é transcrito em RNA
(3) Terminação
a Regulação da transcrição
Em procariotas, transcrição de tradução pode ocorrer simultaneamente
Em eucariotas, a transcrição ocorre no núcleo
tradução ocorre no citoplasma (ver a próxima secção):
RNA deve cruz membrana nuclear
transcrição de tradução estão separados fisicamente
primário transcrito de RNA é amplamente processadas
heterogêneo nuclear RNA (hnRNA) mRNA
Pós-transcricional de processamento de eucarióticas RNA é complexo
promotores potenciadores de determinar o início controle de taxa de
‘limite’ (7-metil-guanosina, 7mG) adicionado aos 5′ fim
‘rabo’ de poli-A (5′-~~~AAAAAAAAAA-3′) adicionado 3′ end
‘emenda’ do hnRNA : genes eucarióticos são “split”
intron sequência de DNA equivalentes removido do hnRNA : “intervenção”
exão sequência de DNA equivalentes representados no mRNA: “expresso” em proteína
1 ~ 12 dos éxons / ‘gene’
>90% de transcrição pode ser “emendado fora’
utiliza o mecanismo de Splicing doador e aceitador sites
Eucarióticas genes mRNA não colinear!
DNA / RNA hibridização produz heteroduplexes
DNA íntrons ‘loop’
DNA exões par com mRNA
Eucarióticas exões pode ser amplamente separadas
splicing Alternativo do mesmo transcrição produz diferentes produtos
Diferentes exão regiões são combinados como diferentes mRNAs
Alternativa exão combinações diferentes funcionalmente
o dever de casa #6: Resolução de problemas com o DNA RNA
o trabalho de casa Contínuo problema:
o Que é um ‘gene’? Como as descobertas de (1) introns e exons amd (2) splicing alternativo em genomas eucarióticos modificam o conceito?