21.1 Clavispora Lusitaniae Rodrigues de Miranda (1979)
Anamorph: Candida lusitaniae van Uden & do Carmo-Sousa
creștere pe YM agar: după 3 zile la 25 de la Subgloboză, ovoidală până la elongație, 2-6 centimetrii 3-10 centimetrii, și apar individual, în perechi sau în lanțuri scurte. Creșterea este butiroasă, albă până la crem, strălucitoare sau ocazional plictisitoare și rugoasă.
creșterea bulionului de extract de drojdie de glucoză: ocazional creșterea poate fi floculentă.
cultura plăcii Dalmau pe agar de făină de porumb: după 1 săptămână la 25 c, pseudohifele sunt abundente și bine dezvoltate. Coloniile pot fi marginite cu pseudohyphae.
formarea ascosporilor: ASCII sunt de obicei bilobați, conținând unul sau doi, rareori trei sau patru, ascospori clavați (Fig. 21.2). Conjugarea Bud-părinte a fost observată într-o singură tulpină (Fig. 21,2 F). Negii pot (Rodrigues de Miranda 1984a) sau nu (Rodrigues de Miranda 1979) să fie vizibili prin microscopie electronică. Ascosporii sunt eliberați de asci la scurt timp după formarea lor. În unele cruci se formează ascospori sferici până la ovoizi (Fig. 21.2 D). Sporularea abundentă are loc 2-4 zile la 17-25 centi c după amestecarea culturilor de tipuri de împerechere compatibile pe agar extract de malț 1% sau agar YCBAS. Aproape toate izolatele sunt fertile.
figura 21.2. Clavispora lusitaniae. (A) SUB 79-257.1 INOX CBS 4413. (B) tuburi de conjugare și (C) zigot CBS 6936 UWOPS 94-252.1. (D) ascospori Ovoidali, G90-244,1 G90-207,5. Tulpina AUTOMICTICĂ MTCC 1001, (E) ascus conjugat; (F) ascus autogam; (G) ASCI delicced și ascospori aglutinați. Bar=5 OQQ. Lachance și colab. (2003c), retipărit cu permisiune.
Fermentation
| Glucose | + |
| Galactose | v |
| Sucrose | v |
| Maltose | v |
| Lactose | − |
| Raffinose | − |
| Trehalose | v |
Growth (on Agar Media)
| Glucose | + |
| Inulin | − |
| zaharoză | +1 |
| Raffinoză | − |
| Melibioză | − |
| galactoză | v |
| lactoză | − |
| trehaloză | + |
| maltoză | +1 |
| Melezitoză | +1 |
| metil-oxid-d-glucozid | v |
| amidon solubil | − |
| Celobioză | v |
| Salicin | +1 |
| l-Sorboză | + |
| l-ramnoză | + |
| d-xiloză | + |
| l-arabinoză | − |
| D-arabinoză | v |
| D-riboză | v |
| metanol | − |
| etanol | + |
| glicerol | + |
| eritritol | − |
| Ribitol | +1 |
| Galactitol | − |
| Mannitol | + |
| Glucitol | +1 |
| myo-Inositol | − |
| dl-Lactate | v |
| Succinate | + |
| Citrate | v |
| d-Gluconate | v |
| d-Glucosamine | v |
| N-Acetyl-d-glucosamine | +1 |
| Hexadecane | v |
| Nitrate | − |
| Vitamin-free | − |
1 rareori negativ (de exemplu, tulpina uwops 92-308.1)
Additional Growth Tests and Other Characteristics
| Xylitol | + |
| 2-Keto-d-gluconate | + |
| d-Glucuronate | − |
| Glucono-δ-lactone | v |
| Amino acid-free | + |
| Nitrite | − |
| Ethylamine | + |
| Lysine | + |
| Cadaverine | + |
| 10% NaCl | + |
| 50% Glucose | v |
| Starch production | − |
| DBB | − |
| Gelatin | − |
| Casein | − |
| Tween 80 | v |
| Acid production | − |
| Cycloheximide 0.001% | +/w |
| 1% Acetic | − |
| creștere la 30 de metri cubi | + |
| creștere la 37 CTT C | + |
CoQ: 8 (Yamada și Kondo 1973).
Mol% G+C: 45,1–45,7, cinci tulpini, inclusiv CBS 4413 și CBS 6936 (BD: Lachance și colab. 1986).
numere de accesare a secvenței genetice, tip tulpină: D1/D2 LSU rRNA=U44817, SSU rRNA=AY497762. Alotip: D1/D2 LSU ARNr = AY190538.
carbohidrați celulari: glucoză și manoză (Suzuki și Nakase 1998).
tipuri de împerechere complementare: CBS 6936, tipul de împerechere h+ și CBS 4413, tipul de împerechere h−.
tip tulpina: CBS 6936.
sistematică: Lachance și Phaff (1998a) au rezumat informațiile disponibile privind variabilitatea întâlnită la specii în asimilarea l-ramnozei, acidului citric și maltozei. Un izolat din agave zdrobite, UWOPS92-308.1, a cărui apartenență la specie a fost confirmată recent (Lachance și colab. 2003c), nu a reușit să asimileze zaharoză, glucozide, glucozide, ribitol, glucono-lactonă și N-acetil-glucozamină. Prin urmare, identificarea bazată pe caracteristicile de creștere nu este fiabilă. În aproape toate cazurile, C. lusitaniae este izolat sub formă de tulpini haploide care suferă reproducere sexuală numai după amestecarea cu un tip de împerechere compatibil. Cele două tipuri de împerechere par a fi distribuite în mod egal în natură. Tulpina MTCC 1001 este unică în capacitatea de a forma asci pe cont propriu, printr–un amestec de conjugare izogamă și bud-părinte. Apartenența la specie este susținută de secvența D1/D2, care este identică cu cea a alotipului. În ciuda descoperirii unei tulpini automictice, identificarea morfologică a C. lusitaniae se realizează cel mai convenabil prin împerecherea necunoscutelor cu tulpini de tipuri de împerechere cunoscute (Fran Inktokois și colab. 2001). Din păcate, alotipul, CBS 4413, se împerechează prost. Fran inktokois și colab. (2001) și Lachance și colab. (2003c) oferă liste de diferite tulpini și eficiența lor de împerechere.
specia este uimitor de polimorfă în subunitățile mari ADNR secvențe, care pot varia cu peste 30 de substituții în domeniul D2 (Lachance și colab. 2003c). Cu toate acestea, nu există nicio corelație între capacitatea de a forma asci maturi prin perechi de împerechere și gradul lor de divergență a secvenței. Unele tulpini haploide sunt eterogene pentru secvențele variante, indicând faptul că acesta este un caz rar în care o specie este substanțial polimorfă pentru acest marker conservat în mod normal. Cum a apărut un astfel de polimorfism nu este clar. O explicație plauzibilă este că specia a fost ruptă alopatric în două populații distincte pentru suficient timp pentru a permite divergența să aibă loc, dar fără dezvoltarea unui mecanism de izolare postzigotică. Reunificarea populațiilor, posibil prin deriva continentală, ar fi permis atunci coexistența variantelor de secvență într-o singură populație Mendeliană.
Ecologie: nișa ecologică a C. lusitaniae este prost definită. Deși drojdia apare în cactus, nu poate fi considerată cactofilă, fiind raportată doar ocazional în aproape 2000 de probe (Starmer și colab. 1990). Mai multe tulpini au fost recuperate din țesutul cactus necrotic din Antigua de către P. F. Ganter. Interesant este că aceste probe nu au produs Niciun C. opuntiae așa cum ar fi de așteptat în mod normal din acel habitat. Într-un studiu al drojdiilor asociate cu agave cultivate pentru producția de tequila, Lachance (1993b) a constatat că C. lusitaniae este cea mai abundentă specie din putrezirea acetică la baza frunzelor din această plantă.
Biotehnologie: necunoscut
Agricultură și alimentație: necunoscut
importanță clinică: Clavispora lusitaniae este recuperată în mod regulat în probele clinice, dar nu este considerată un adevărat agent patogen uman (Hurley și colab. 1987). A fost recunoscut pentru prima dată ca un organism infecțios oportunist de Holzschu și colab. (1979) și de atunci a apărut în peste 100 de exemplare de la pacienți care suferă de deficiențe imune (Gargeya și colab. 1990). Un studiu al 35 de izolate clinice (Merz și colab. 1992) a arătat că o cantitate semnificativă de variație a dimensiunilor cromozomilor are loc de la clonă la clonă. Aceste tulpini ar putea fi atribuite, pe baza electrokariotipurilor lor, la 15 grupuri corespunzătoare celor 15 pacienți din care au fost izolați.